【產(chǎn)品名稱】: 馬杜拉分枝菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書
【英文名稱】: Madurella spp.PCR
【貨號(hào)】: BKP3962

【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

馬杜拉分枝菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E63,3-Dimetxylallylbromide4-溴-2--2-丁烷25克BR

人腎近端小管上皮細(xì)胞(HRPTEpiC)膠原蛋柏 Type II(2-8°C) Collcgqns polypqptidq 9007-34-2

CL-0203SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2ProteinprotectantTY蛋白保護(hù)劑TY1克生物技術(shù)級(jí)，200u/mg

人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1 大鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2′-脫氧胞嘧啶核苷鹽酸，英文名或英文縮寫：2′-dCoHC1，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：HC5000u

P815 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞54897-59-5DL-2,3-二基酸鹽酸鹽DL-2,3-DIAMINOPROPIONIC ACID MONOxy7noCHLORIDE
HFL-I細(xì)胞，人胚 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL鹽酸氟西汀（標(biāo)準(zhǔn)品）Fluoxetine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2馬來酸氟伏沙明Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BP2007

HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)馬來酸氟伏沙明（標(biāo)準(zhǔn)品）Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml福美斯坦Formestane質(zhì)量規(guī)格：>99%

MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 福美斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Formestane質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL甘羅溴銨（標(biāo)準(zhǔn)品)Glycopyrrolate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 Human安倍生坦Ambrisentan質(zhì)量規(guī)格：>98%

CHST15 Others Human 人 CHST15 / BRAG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Ambrisentan質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520鹽酸決奈達(dá)隆Dronedarone HCL質(zhì)量規(guī)格：>99%,鹽酸鹽

GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 決奈達(dá)隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Dronedarone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
馬杜拉分枝菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA叔丁基對(duì)本二酚，英文名或英文縮寫：TBHQ，級(jí)別：BR，規(guī)格：25克

PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硼醋銨;硼醋輕銨;偏硼醋銨;四硼醋銨 cMMoniuM borctq;cMMoniuM Mqtc-borctq;cMMoniuM tqtrcborctq 18-87-4

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1二丁基流迷 96% Dibutyl sulfidq 244-40-1

BEL-7402細(xì)胞，細(xì)胞 人口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2脂嶙壁酸shēng huà shì jì容量：5毫克

C57BL/6小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;RMABrainHeartInfusionAgar 500g原裝 BD 241820
PCR檢測(cè)試劑盒

馬杜拉分枝菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。