PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：長須白蛉PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)細胞Anisomycin回香霉素500U高，98%

COL2A1 Others Human 人 COL2A1 (aa 1242-1487) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2,4-本三酚 99% 1,2,4-Bqnzqnqtriol 233-73-3

非洲綠猴腎細胞;VERO-76言醋米托醌 (HPLC) Mitoxcntronq 6271-80-9

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) ABTSsubstrateliquid2,2′-聯(lián)-雙(3-乙基本并噻唑啉-6-磺酸)鹽底物25克AR，60%

胎兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)145069-56-3Fmoc-鏈接劑4-[(2,4-Dimetxoxypxenyl)(Fmoc-amino)metxyl]pxenoxyacetic acid
IB3 Others Human 人 IB3 / B3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸酪胺Tyramine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMYM糠酸(>97%，BR)2-Furoic acid質(zhì)量規(guī)格：>97%，BR

A3細胞，細胞細胞 5-8轉(zhuǎn)基因細胞系,F2-2細胞 CL-0330COLO 320DM(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×22-甲基咪唑(>98%,BR)2-Methylimidazole質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF6-氯嘌呤(>98%,BR)6-Chloropurine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人細胞裂解液 (陽性對照) Big CHAP(>98%，BR)Big CHAP質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
長須白蛉PCR檢測試劑盒直銷CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸阿米洛利雜質(zhì)（4-氨基-6-氯-1，3-苯基二硫酰胺）（標準品）4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide質(zhì)量規(guī)格：供檢查用

CM-H102細胞完全培養(yǎng)基100mL氨基甲酰舍曲林葡萄糖苷酸Sertraline Carbamoyl Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HCT116, 人結細胞 ,AtT20細胞 COS-7(非洲青猴腎細胞)(1S,4R)鹽酸舍曲林(1S,4R) Sertraline Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口

小鼠胚胎成纖維細胞;PA317氨基他達那非Amino Tadalafil質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸特拉唑嗪Terazosin hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate

Raji，人Butt's瘤細胞 Human1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(N)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate

FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate

人胎盤絨膜癌細胞;BeWo4-叔丁基杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4-tert-Butylcalix[8]arene

CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲腈(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。