本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Nematodirus spp.PCR
【貨號】: BKP4082
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

CM-M088小鼠破骨細胞完全培養基100mL乙二酸鍶，英文名或英文縮寫：Strontium oxalate，級別：CP，69%，規格：250毫升

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 小細胞細胞,LIEP-P細胞 DT40(雞瘤細胞)7-氧基-2-四輕同 7-Mqthoxy-2-tqtrclonq 4133-34-0

小鼠細胞;BC3H1(-)-薄荷醇，英文名或英文縮寫：Menthol，級別：CP，70%，規格：25克

CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 2′-脫氧尿苷-5′-三嶙酸四鈉鹽5克

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3(15-30萬)(多聚-L-賴酸)
CD69 Others Human 人 CD69 人細胞裂解液 (陽性對照) Tigecycline質量規格：含量>99.0%

小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32（標準品）Tigecycline質量規格：HPLC>98%,標準品

TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 替米考星Tilmicosin質量規格：干品度≥90.0%，干品含量≥85.0%，USP34

原代肝實質細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml替米考星(標準品)Tilmicosin質量規格：含量測定

RCC-krause細胞，細胞 人細胞,CaSKi細胞 人內根殼細胞總RNAHHIRSC NA馬來酸噻嗎洛爾Timolol Maleate質量規格：>99%,USP
細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書人上皮細胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細胞完全培養基 100mL乙酰唑胺Acetazolamide質量規格：>99%

腦膜細胞培養基MenCM-prfBr-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)質量規格：>98.0%(T)

SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-酮(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 質量規格：>98.0%(T)

大鼠肺大動脈內皮細胞完全培養基 100mL4-溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 質量規格：>98.0%(HPLC)

BLU-87 人膀胱移行細胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內含2mM-glutamine)+10%胎牛血清 DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-(N-肼基羰甲基-N-甲基)氨基-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羥甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸質量規格：>99%,ARTES

中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細胞瘤細胞，P815細胞 INS-1細胞，大鼠細胞3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉質量規格：>98%,BRTAPSO mono

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GPTAPSO；3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸質量規格：>99%,BRTAPSO

STIM1 Others Human 人 STIM1 / GOK 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉質量規格：>99%,BRTAPS  Salt

神經元細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)S-I-G-S-L-A-K質量規格：>95%,BRS-I-G-S-L-A-K

PCR檢測試劑盒：

細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。