技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：人支原體PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
倉鼠卵巢細胞;Lec1DNAMarkerⅡ5克

CCL24 Others Human 人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二 3,5-Difluoropyridine,97% 71902-33-5 1G 通用試劑

CL-0041BT-549(人管癌細胞)5×106cells/瓶×2L-羌基脯安醋 L-xy7noxyprolinq 21-32-4

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化) 細胞(瘤株),OS-732細胞 PANC-1(細胞)羥丙基-β-環糊精5克2～8℃

小鼠血細胞;WEHI-3 [WEHI3]5445-17-0α-溴metxyl 2-bromopropionate
CM-R107大鼠海馬神經元細胞完全培養基100mL水溶性四氮唑-8;WST-8Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008質量規格：BR,>97%

Raji，人Butt's瘤細胞水溶性四氮唑-5GLT005質量規格：BR

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0919 人成骨細胞完全培養基 100mL水溶性四氮唑-4GLT004質量規格：BR

小鼠;F9積雪草酸Asiatic acid質量規格：HPLC≥90%,BR

SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人細胞裂解液 (陽性對照) 積雪草酸（標準品）Asiatic acid質量規格：HPLC≥98%，標準品
人支原體PCR檢測試劑盒說明書H9c2細胞，大鼠心肌細胞 人細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2D-別異亮氨酸D-allo-Isoleucine 質量規格：0.98

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-D-纈氨醇 D-Valinol質量規格：>98%

CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照) L-苯甘氨醇 L-Phenylglycinol質量規格：>98%,BR

破骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-L-脯氨醇 BOC-L-Prolinol質量規格：>98%,BR

NA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 絲氨醇,2-氨基-1,3- 2-Amino-1,3-propanediol 質量規格：>99%,BR
Ramos細胞，血細胞瘤細胞系 615小鼠前瘤株,Fc細胞 人成纖維細胞-心房裂解物HCF-aa L布比卡因(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品Bupivacaine base

NCI-H358(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2馬來酸桂哌齊特質量規格：>99%Cinepazide maleate

CFPAC-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤細胞;S-180馬來酸桂哌齊特(標準品)質量規格：含量測定Cinepazide maleate

豚鼠肺細胞;GP-F1磺胺嘧啶鈉質量規格：>98%,BR sulfadiazine(SD-Na)

人滑膜細胞(HS)( 5×105 )補骨脂寧;補骨脂異黃酮質量規格：HPLC≥98%，標準品Corylin