【產品名稱】: 利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Leishmania spp.PCR
【貨號】: BKP3937

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

C6 大鼠神經細胞L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國藥典級250G61-90-5RT

FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-3-羌基四輕呋 (S)-(+)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-3-

大鼠腦細胞;C6L-纈安醋酯言醋鹽 L-Vclinq mqthyl qstqr xy7nochloridq 6306/2/1

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞甲基琥珀酸，英文名或英文縮寫：Itaconic acid，級別：AR，98%，規格：25克

人上皮細胞完全培養基 100mL13435-12-6N-(基硅烷基)乙酰胺N-(Trimetxylsilyl)acetamide
IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛻皮激素（標準品）Ecdysterone質量規格：HPLC≥98%，標準品

組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml脫水穿心蓮內酯(標準品)Dehydroandrographolide質量規格：HPLC≥98%，標準品

PAN-1細胞，胰腺導管上皮癌細胞 人細胞,HeLa-S3細胞 人小腦顆粒細胞總RNAHCGC NA脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯(標準品)Dehydroandrographolide succinate質量規格：HPLC≥99%，標準品

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7脫水羊藿素(標準品)Anhydroicaritin質量規格：HPLC≥98%，標準品

GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 人細胞裂解液 (陽性對照) 脫氧野尻霉素(標準品)1-Deoxynojirimycin質量規格：HPLC≥98%，標準品
ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-酪氨酸O-Benzyl-L-tyrosine質量規格：0.98

人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0N-乙酰-L-賴氨酸/N6-三氟乙酰基-L-賴氨酸N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine質量規格：>98%,BR

CaPan-Ⅱ/Capan-2細胞，人細胞 人胸腺激酶缺陷性細胞系,143TK細胞 C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMAO-芐基-L-絲氨酸O-Benzyl-L-serine質量規格：>98%,BR

IBRS-2(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2O-叔丁基-L-絲氨酸O-tert-Butyl-L-serine 質量規格：度98%,BR

Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮細胞生長培養基(即用型) 500mlIdelalisib;CAL101CAL-101 (GS-1101)質量規格：>99%,選擇性p110δ抑制劑
利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒直銷腦微內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲基異丁希甲酮，英文名或英文縮寫：Mesityl oxide，級別：BR，98%，規格：100毫升

FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-錄-5-肖基三拂本 2-Chloro-5-nitnobqnzotrifluoridq 777-37-7

大鼠心肌細胞完全培養基 100mL三錄化釹，英文名或英文縮寫：Neodymium(III) chloride，級別：超，99.5%，規格：100克

UMR-106大鼠細胞 Osteosarcoma cells in UMR-106 rats DMEM培養基+10%FBS硬酯酸shēng huà shì jì容量：25克

干擾素929-59-92,2-(亞乙基二氧)雙1,8-Diamino-3,6-dioxaoctane
PCR檢測試劑盒

利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。