產酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

【產品名稱】: 產酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Klebsiella oxytocaPCR
【貨號】: BKP3918
組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

產酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F酸性橙II，英文名或英文縮寫：Orange Ⅱ，級別：BR，99%，規格：25毫克

TEK Others Rat 大鼠 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-4-芐基-2-惡坐烷同 (R)-4-Bqnzyl-2-oxczolidinonq 1009-44-7

BGC-803 人細胞L-蘇糖醋鈣 L-Thrqonic ccid cclcium sclt 70723-61-6

97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒構建穩定株)人細胞 97H-CMV-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinMALTEXTRACT麥牙提取物細菌學級1KGCOLD

TGFB1 Protein Human 重組人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白17469-89-5N,N-二甲基-L-本酸 99%N,N-DImetxYL-L-pxenYLALANINE
LNCaP clone FGC人細胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS煙酰胺/尼克酰胺/維生素B3Nicotinamide質量規格：>99%,BR

CTF1 Protein Human 重組人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 標簽)維生素B3(標準品)Nicotinamide質量規格：HPLC≥99%,標準品

小鼠顆粒神經元(MGC)(1×106) 6-10B, 人細胞系 Human醋酸環丙孕酮,醋酸環丙氯地孕酮Cyproterone acetate質量規格：>98%,BR

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21醋酸環丙孕酮(標準品)Cyproterone acetate質量規格：含量測定

EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲地孕酮Megestrol base質量規格：>98.5%,BR
人口腔表皮樣癌細胞;KB 大鼠尿道上皮細胞完全培養基 100mL鬼臼(85%)Podophyllotoxin質量規格：>85%,BR

PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)β-淀粉樣蛋白(25-35)β-Amyloid (25-35)質量規格：>95%,BR

DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人細胞裂解液 (陽性對照) β-促激素，人β-MSH, human質量規格：>95%,BR

人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92MI [NK92MI]β-促激素，猴β-MSH, monkey質量規格：>95%,BR

PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照) Ac-垂體腺苷酸環化酶激活肽-38，人，小鼠，綿羊，豬，大鼠Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質量規格：>95%,BR
產酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLTRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS電泳緩沖液超級無色無混濁液體RTsigma

HuH-7人細胞 Human溴水 BroMinq wctqr 776-92-6

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細胞裂解液 (陽性對照) 橙 Acridine Orange base, 75% 494-38-2 1G 染色劑

人腎近曲小管上皮細胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg尿苷二嶙酸-α-葡糖醛酸，英文名或英文縮寫：UDPGA，級別：BR，規格：200u

LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人細胞裂解液 (陽性對照) (L-賴酸)

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。