PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：甲型病毒92亞型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

間充質干細胞生長添加物MSCGS偶氮錄嶙Ⅳ，英文名或英文縮寫：CPA-Ⅳ，級別：色固，規格：25克

C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Compleme Compone 2 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-半胱安醋 BOC-CYS-OH 0887-92-0

人B細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)細胞核堅牢紅，英文名或英文縮寫：Nuclear fast red，級別：色固，規格：250毫克

大鼠細胞;GH3 膀胱移行細胞癌細胞，T24細胞 MDBK (NBL-1)細胞，牛腎細胞纖維玻璃，英文名或英文縮寫：Glass Fiber，級別：BR，99%，規格：25克

HNE2, 人細胞系 HumanN-Octyl-b-D-Thioglucopyranoside 1g 原裝 Amresco J575
NCI-H2452 [H2452]人間皮瘤細胞 NCI-H2452 [H2452] human skin tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS暈苯(>95.0%(GC))Coronene質量規格：>95.0%(GC)

PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標簽)暈苯(升華提)(>98.0%(GC))Coronene (purified by sublimation)質量規格：>98.0%(GC)

馬間葉干細胞(脂肪)(5×105) Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞 Mouse心環1(>97.0%(GC))Corannulene質量規格：>97.0%(GC)

豬胚胎傳代細胞;ST2,5-二苯基-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC))2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole質量規格：>98.0%(HPLC)

RAMP3 Others Human 人 RAMP3 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,5-二(1-萘基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(N)(HPLC))2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazole質量規格：>98.0%(N)(HPLC)
甲型病毒92亞型PCR檢測試劑盒供應CM-H083人臍動脈內皮細胞完全培養基100mL膽堿非諾貝特Choline Fenofibrate質量規格：美國進口

Hepa 1-6, 小鼠細胞丙磺舒酰基β-D-葡萄糖苷酸Probenecid Acyl β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

人癌細胞;MDA-MB-453 人角膜成纖維細胞完全培養基 100mL諾氟沙星-d5Norfloxacin-d5質量規格：美國進口

人口腔角質細胞cDNAHOK cDNA4-含氧諾氟沙星4-Oxo Norfloxacin質量規格：美國進口

CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基諾氟沙星N-Hydroxy Norfloxacin質量規格：美國進口
RBE, 人肝細胞6-去氟-6-羥基利培酮質量規格：美國進口6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone

HUVEC, 人臍內皮細胞7-羥基利培酮質量規格：美國進口7-Hydroxy Risperidone

人B母細胞;HMy2.CIR 人平滑肌細胞完全培養基 100mL羥基利托那韋質量規格：美國進口Hydroxy Ritonavir

人正常肝細胞;L-02去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韋質量規格：美國進口Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir

DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 9'-去甲格拉司瓊（格拉司瓊雜質C）質量規格：美國進口9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。