技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
細胞名稱 種屬二水合錄化鈣，英文名或英文縮寫：Calcium chloride dihydrate，級別：AR，99.5%，規格：250毫克

CD83 Others Human 人 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧化輔酶 ≥97%(-20℃) Coccrboxylcsq 124-87-0

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-EUREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學級透明無色液體COLDsigma

人主動脈內皮細胞 (HAEC)( 5×105 )2-乙基丁醇，英文名或英文縮寫：2-etxyl-1-butanol，級別：高，99%，規格：25克

CL-0019AAV-293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2Ammoniumsulfate 250g/500g/1kg/5kg Amresco 0191
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基硫酸鋰Lithium Dodecyl Sulfate質量規格：>98%,分子生物學級

CM-R094大鼠胎兒表皮角質形成層細胞完全培養基100mL硫代甜菜堿 8Sulfobetaine 8質量規格：>98%,sigma分裝

HEC-1A, 人細胞系 肝細胞,BRL細胞 TE 115.T(人軟組織細胞)硫代甜菜堿 10Sulfobetaine 10質量規格：>98%,BR

小鼠細胞;L1210硫代甜菜堿 12Sulfobetaine 12,SDDAB質量規格：>98%,BR

EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 恩他卡朋;COMT抑制劑Entacapone質量規格：>99%,BR
脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒直銷EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅試劑Zincon質量規格：螯合劑

F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-三甲硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide質量規格：>92.0%(GC)

U373細胞，人腦細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-三甲基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole質量規格：>98.0%(T)

SK-N-BE(2) (人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide質量規格：>98.0%(GC)

HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane質量規格：>97.0%(GC)
RSC, 大鼠雪旺細胞偶氮脒類引發劑V65100毫克保存：-20℃

轉化細胞 人卵巢成纖維細胞完全培養基 100mL2,3-務二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6

人脈絡叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克

KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠血清(無菌)100克RT

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)2-脫氧鳥苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA