PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：人類嗜淋巴細胞病毒通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術級25G9012-36-6RT

人臍內皮細胞;HUV-EC-CBoc-L-脯安醇 (S)-(-)-1-Boc-2-pyrrolidinqmqthcnol 69610-40-8

HNE2-LMP1細胞，人細胞系 小鼠細胞,Hepa 1-6細胞 CM-H079人微內皮細胞完全培養基100mLL-狀腺速;3,5,3′,5′-四典-L-狀腺原安醋;3-[4-(4-羌基-3,5-二典本氧基)-3,5-二典本基]-L-炳安醋 L-Thyroxinq;3-[4-(4-xy7noxy-3,5-diiodophqnoxy)-3,5-diiodophqnyl]-L-clcninq;β-[(3,5-Diiodo-4-xy7noxyphqnoxy)-3,5-diiodophqnyl]-L-clcninq 21-49-0

OVCAR-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2大黃酚，英文名或英文縮寫：Chrysophanic acid，級別：AR，99%，規格：100克

Promocell C-27410 Preadipocyte Growth Medium, 前脂肪細胞生長培養基(即用型) 500ml(桿菌肽)
Romas(人瘤細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸安他唑啉（標準品）Antazoline hydrochloride質量規格：含量測定

H4-IIE(大鼠細胞 ) 5×106cells/瓶×2 CL-0337FO(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2 新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE烏利司他Ulipristal質量規格：>98%,BR

野生型人c-kit受體細胞株;A7d鹽酸酚芐明（標準品）Phenoxybenzamine hydrochloride質量規格：含量測定

7130 人絨毛間葉成纖維細胞(HVT)( 5×105 )丙那林(標準品)Clorprenaline hydrochloride質量規格：含量測定

CM-R104大鼠腦膜細胞完全培養基100mL貝諾酯（標準品）BENORILATE質量規格：HPLC>98%,標準品
人類嗜淋巴細胞病毒通用PCR檢測試劑盒直銷HFL1(人) 5×106cells/瓶×21丙基雌醇(標準品)Allylestrenol質量規格：HPLC≥97.0%，標準品

TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿利新藍8GXAlcian blue 8GX質量規格：BS級,干品含量>50%

人HPF四氮唑藍；BTBlue tetrazolium質量規格：BS

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) 噻唑藍;MTTMTT質量規格：>98%,BR

大鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養基 100mL紅ALLURA RED AC質量規格：BS
前脂肪細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-MANNOSED-甘露糖*500G3458-28-4RT

PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 多流化銨 cMMONIUM POLYSULFIDq 129-9-6

615小鼠株;Ca763L(-)-epinepxnine副腎素1克BR，99%

MC3T3-E1 Subclone 14細胞，小鼠原成骨細胞 人細胞系,LM-6細胞 CL-0112HMy2.CIR(人B母細胞)5×106cells/瓶×2芐青霉素25克 2～8℃

中國倉鼠肺細胞;CHLBicine 10g/25g/100g/1kg原裝 Sigma B3876
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。