人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

【產(chǎn)品名稱】: 人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Parainfluenza Virus(HPIV)RTPCR
【貨號】: BKP3850
組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

人腎系膜細(xì)胞 (HRMC)(1×106 ) 細(xì)胞名稱 種屬聚酸鈉100毫克保存：-20℃

大鼠肺細(xì)胞;WL1DL-酪酸 DL-Tyrosine,99% 556-03-6 25G 通用試劑

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肉豆蔻醋異炳酯;十四醋異炳酯;十四醋1-基基酯 Isopropyl Myristctq;Isopropyl tqtrcdqccnoctq 110-7-0

KU812 人外周血嗜堿性細(xì)胞亞1克

MS751人子宮頸表皮癌細(xì)胞 MS751 human cervical epidermoid carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS12232-99-4鉍酸鈉wo7ium BISMUTHATE
SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系纈絡(luò)肽（VQY），豬Valosin Peptide (VQY),porcine質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812 大鼠腎系膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL活性腸肽Vasoactive Intestinal peptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Lewis 小鼠細(xì)胞Z-Ala-Ala-Leu-pNAZ-Ala-Ala-Leu-pNA質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三亞甲基碳酸酯TMC 質(zhì)量規(guī)格： 度≥99%

小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte碳酸錳(>98%,BR)Manganese (II) carbonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CM-H096人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL透明質(zhì)酸酶Hyaluronidase質(zhì)量規(guī)格：≥500IU/mg,BR,牛源提取

轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1 小鼠平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN2-異丁酰-2'-脫氧鳥甙ibu-dG質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 RattusN-苯甲酰-2'-脫氧胞苷bz-dC質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N6-苯甲酰-2'-脫氧腺苷bz-dA質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人癌細(xì)胞;MCF 7B5'-O-三苯甲基尿苷Trt-rU質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-葡萄糖苷伐倫克林質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Varenicline N-Glucoside

山羊皮膚細(xì)胞;WGS1伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去乙酰基長春瑞濱質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Deacetyl Vinorelbine

CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×21酸長春瑞濱水合鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Vinorelbine ditartrate salt hydrate

HGC-27人細(xì)胞 細(xì)胞，HelaS3細(xì)胞 ES-2(卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)N-代丁二(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Iodosuccinimide

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。