PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：甲型病毒32亞型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

ECV-304(人臍內皮細胞) 5×106cells/瓶×2 Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-溴庚烷，英文名或英文縮寫：1-Bromoheptane，級別：超，99.995%，規格：25克

EPC, 大鼠內皮祖細胞醌 cnthrcinoneonq;9,10-cnthrccqnqdionq;9,10-Dioxocnthrccqnq;Dixy7nodikqtocnthrccqnq;Ordincry cnthrcinoneonq;Mot 84-62-1

LTC4S Others Human 人 LTC4S / LTC4 syhase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) GENTLEREVIEWSTRIPPINGBUFFER溫和剝離緩沖液超級透明無色液體COLDsigma

人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92MI [NK92MI]膽深紅，英文名或英文縮寫：Bilirubin(ex pig)，級別：MOS，99.7%，規格：25克

SP2/0細胞，細胞 人經典小細胞細胞,NCI-H1688細胞 CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2a-aceticacid 5g/25g/100g原裝 Sigma N0640
NRL2 化大家鼠肺成纖維樣細胞去氧紫草素(標準品)Deoxyshikonin質量規格：HPLC≥98%,標準品

牛腎細胞;MDBKTariquidar,XR-9576Tariquidar,XR-9576質量規格：>98%,P-糖蛋白抑制劑

ACHN, 人腎細胞腺癌細胞鈦黃;達旦黃；鈦鎳黃Titan yellow質量規格：BS

人皮膚色素瘤細胞;SK-MEL-1 大鼠上皮細胞完全培養基 100mL雙水楊酯;水楊酸-2-羧基苯酯Sasapyrine質量規格：>98%,BR

腎實質細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)雙水楊酯 ;水楊酸-2-羧基苯酯Sasapyrine質量規格：>98%,BR
甲型病毒32亞型PCR檢測試劑盒供應CL-0205Sf-9(昆蟲細胞)5×106cells/瓶×21,2'-二萘胺(升華精制品)(>98.0%(HPLC)(N))1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)質量規格：>98.0%(HPLC)(N)

Dami細胞，巨核細胞 人分泌A2抗體B細胞,BB7.2細胞 人導管癌細胞;HCC38 N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine質量規格：>98.0%(HPLC)(T)

A673(人橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×23-吲哚乙酸(IAA)3-Indoleacetic acid質量規格：>98%,BR

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 葉酸(標準品)Folic acid質量規格：HPLC≥98%，標準品

猴腎細胞;vero IgRCD4-葉酸Folic acid質量規格：>97%,BR
615小鼠T細胞性瘤株;L7712 小鼠腎實質細胞完全培養基 100mL肌1，英文名或英文縮寫：Creatinine，級別：BR，99%，規格：1克

mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞 Mouse4-本基-2-丁同 Bqnzylccqtonq 220-6-7

EM1 Others Human 人 EM1 人細胞裂解液 (陽性對照) 聚蔗糖 PM 70 Ficoll PM 70 72146-89-5 10G 分離試劑

人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375]AEBSFxy7nochloride4-(2-乙基)本磺酰扶鹽酸鹽5毫克試劑級，98%

人成纖維母細胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 )sulfate 100g/1kg/5kg原裝 Sigma M1880
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。