實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔子皮質(zhì)/上腺(CO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione  中文名：9-羥基-4-雄甾烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3 

兔子凝血因子Ⅱelisa試劑盒   兔子凝血因子Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子凝血因子Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子凝血因子Ⅱ試劑盒、兔子凝血因子Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid  中文名：  分子式：C18H26O4  度：%

兔子凝血因子Ⅱelisa試劑盒   兔子凝血因子Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子凝血因子Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子凝血因子Ⅱ試劑盒、兔子凝血因子Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene  中文名：9,10-雙(3,5-二羥苯基)蒽  分子式：C26H18O4  度：98.0%

兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2  度：98.0%

兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2  度：98.0%
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A3A分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 3 ?質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱

HAVCR1 Others Human  KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3A分子篩(80-100目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 3 ?質(zhì)量規(guī)格：80-100目,氣相、液相色譜柱

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

諾如病毒GⅠ型PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）TNFSF12 Others Rat 大鼠 TNFSF12 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯Phorbol 12-myristate 13-acetate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Gambogic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品
CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標(biāo)簽)尼美舒利Nimesulide質(zhì)量規(guī)格：>99%

Sf-21(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2  ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硝酸咪康唑Miconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格：>99%

整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]硝酸咪康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Miconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

ACVR1C Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸小諾霉素/硫酸小諾米星/硫酸沙加霉素Micronomicin Sulfate質(zhì)量規(guī)格：含量≥590 μg/mg

臍血間質(zhì)干細(xì)胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells小諾霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）Micronomicin Sulfate質(zhì)量規(guī)格：效價測定
Quetiapine fumarate  中文名：富馬酸喹硫平  分子式：C46H54N6O8S2  度：98.0%  HoechstStainingKit

Pramipexole di  中文名：鹽酸普拉克索  分子式：C10H19Cl2N3S  度：98.0%  Kisser封片液   10ml

N-6-Methyl-7,7-dioxo-2-sulfamoyl-5,6-dihydro-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-yl]acetamide  中文名：  分子式：C10H14N2O5S3  度：98.0%  Kisser'sMouingMedium                 

1,5-Pentanediol diacrylate  中文名：  分子式：C11H16O4  度：98.0%  戊二 (25%)   100ml

Atracurium oxalate  中文名：阿曲庫胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16  度：98.0%  Glaraldehydesolion   500ml