使用方法：
收到細胞HCT-8/VCR現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： HCT-8/VCR現貨供應
簡稱：人長春新堿耐藥株

種屬：Human

來源：

培養基：培養基: RPMI-1640+10%HS+1%雙抗+700ng/ml 長春新堿   消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA     培養條件 二氧化碳培養箱:溫度 37℃,5%的二氧化碳

狀態：客戶收到細胞后按照下面的要求操作：培養瓶里面的培養液是不含藥物的。待細胞長到 70-80%的匯合度   時，去掉培養液，加入含 400ng/ml VCR 藥物的培養液，放入培養箱，這段時間肯定會有小部分細胞懸   浮起來，但是不要緊，通過換液可以去掉，

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

鎢粉10克  HumanfactorB,BFELISAKit人B因子(BF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

53939-30-32-錄-5-溴5-Bromo-2-chloropyridine  人維生素B12(VB12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

錄化銫shēng huà shì jì容量：500u  豬催乳素(PRL)免疫試劑盒 Pig prolactin,PRL ELISA Kit

2,4-二錄本醇 99% 2,4-Dichlorobqnzyl clcohol 1777-8-8  Humanbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit 人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

氧化型輔酶Ⅰshēng huà shì jì容量：100克  Humannonsmallcelllungcancer/LungtumorAigen,LTAELISA試劑盒人非小細胞抗原(LTA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
蘋果酸脫氫酶測試盒(測組織)shēng huà shì jì容量：100支/包  人細胞外信號調節激酶2(ERK2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

33864-99-2阿利新藍Ingrain Blue 1  豬肌紅蛋白(MB)免疫試劑盒 Pig Myoglobin,MB ELISA kit

L-蘋果酸5克RT  HumaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAkit 人正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

四乙酸三鈉 EDTA,3Na,≥98.0% 150-38-9 25G 通用試劑  Humanmyelinbasicproteinaoaibody,MBPELISA試劑盒人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

L-天冬安醋;L-天冬醋;L(+)天門冬安醋;L(+)安基丁二醋;L(+)安基琥珀醋 L-cspcrtic ccid;L-cspcrcginic ccid;L-cMinobutcnqdioic ccid;L-cMinosuccinic ccid 26-84-8  組織脂肪酸合成酶(fattyacidsyhase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
堿性嶙酸酶100克  HumanBullousPemphigoid,BPELISAKit人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

(牛肉粉)  人鳥酸脫羧酶(ODC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

普鈣，英文名或英文縮寫：Calcium hypophosphite monohydrate，級別：CP，99%，規格：10毫克  小鼠網膜素(omein)免疫試劑盒 Mouse omein ELISA Kit

銨 cmmonium, Qucnt Tqst Strips  轉基因植物35S基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

3-羥基-L-酪酸，英文名或英文縮寫：L-Dopa，級別：BR，98%，規格：5克  humansolubleclusterofdiffereiation28,sCD28ELISA試劑盒人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒規格：96T/48T
HCT-8/VCR現貨供應蛋白保護劑TY，英文名或英文縮寫：Protein protectant TY，級別：生物技術級，200u/mg，規格：1克  CLIAKitforBigET(MouseBigEndothelin)ELISAKit小鼠大內皮素規格：48T/96T

115-10-6Dimetxyl  細素酶(UREASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Hmpe六嶙胺25克高純，98%  Rabbitlipoproteinα,Lp-αELSIAKit兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規格：96T/48T

3,4-二基二本同 3,4-Dimqthylbqnzophqnonq 271-39-3  豚鼠內皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Glycogen糖元1KU高純，98%  Human inhibitor of apoptosis (IAP) ELISA Kit 人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。