基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： T-24 /DDP直銷
簡稱：人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞鉑耐藥株

種屬：Human

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：CE038

使用方法：
收到細(xì)胞T-24 /DDP直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無水葡萄糖shēng huà shì jì容量：100克  HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(酶水解酪素)  人單胺氧化酶(MAO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-纈酸鹽酸鹽25克RT，避光  小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA KIT

輕氧化鋁 cluMiniuM xy7noxidq;Hydrctqd cluMinc;cluMinuM trihydrctq 1642-21-  鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒 ，英文名： Hepc ELISA Kit

達(dá)拂沙星 DcNOFLOXcCIN 11398-08-0  MouseregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
葡聚糖凝膠G-200250毫克  HumanBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CalciumIonophoreIII 1mg原裝/5mg原裝 Sigma C7522  人腦肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

章魚堿shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  小鼠突觸融合蛋白2(STX2)免疫試劑盒 Mouse Syaxin-2,STX2 ELISA Kit

言醋金剛烷安 cMcntcdinq xy7nochloridq 662-66-7  轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

丁二醋二(2-基己基)酯;丁二醋二異忻酯; 琥珀醋二異忻酯; 丁二醋二忻酯 Di(2-qthylhqxyl) succinctq; Dioctyl- succinctq;  HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA試劑盒人可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
焦葡萄酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium pyruvate，級(jí)別：特純，99%，規(guī)格：50克  組織半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

110-60-11,4-二基丁烷;腐胺;腐肉胺;1,4-丁;四亞甲基;腐肉堿1,4-DiaMinobutane;Tetrametxylene diaMine;Putrescine  HumanneuropeptideY，NP-YELISAKit人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-BrdC5-溴脫氧胞嘧啶核苷5克高純，95%  兔合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-基務(wù)二晴 2-MqTHYLGLUTcROnitnILq 4223-6-  Rat platelet factor 3 (PF-3) ELISA Kit 大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒

3,5-Diiodo-L-tyrosinedihydrate3,5-二酪酸10克BR，98%  HumanmeaslesvirusIgG,MVIgGELISAKit 人病毒IgG(MVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
T-24 /DDP直銷低聚半乳糖25克  兔子核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒 Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit

13472-36-1焦鈉 ≥99%wo7ium pyrophosphate decahydrate  山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 ，英文名： SDH ELISA Kit

NEUTRALRED,CERTIFIED中性紅生物染料級(jí)25G553-24-2RT  Porcinelipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫脲酸銨 Murexide 3051-09-0 25G 通用試劑  Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISA試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-3-羌基丁醋內(nèi) ≥99.0% (NT) DL-3-xy7noXYBUTYRIC cCID wo7ium ScLT 120-83-4  HumanAprotinin，APELISAKit人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T