使用方法：
收到細(xì)胞腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1333

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

橡膠促進(jìn)劑D，英文名或英文縮寫：DPG，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：500克  MonkeyIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Aminopterin 5mg/10mg/50mg Sigma A-1784  ELISAKitOPG小鼠骨保護(hù)素規(guī)格：48T/96T

3-Aminopxenol間基酚1克CP，98%  Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1ELISAKit人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

刀豆球蛋柏A(+4℃) CONCcNcVcLIN c TYPq III 1108-71-0  人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Puromycindixy7nochloride二氫錄化嘌呤毒素100毫克3400～20100，液體,5條帶  小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒 Mouse Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit
青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液，英文名或英文縮寫：Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated，級(jí)別：高純，90%，適合電泳，規(guī)格：750U  CLIAKitfory-II(Humanypsinogen-2)ELISAKit人胰蛋白酶原Ⅱ規(guī)格：48T/96T

霧抑制劑Chromium-fog inhibitor  胚胎干細(xì)胞中胚層(mesoderm)細(xì)胞分化熒光檢測(cè)試劑盒10次

甘酰-L-谷酰，英文名或英文縮寫：Glycyl-L-glutamine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：1克  ELISAKitATA人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體規(guī)格：48T/96T

BOC-S-Trityl-L-半... Boc-Cys(Trt)-OH,97% 21947-98-8 1G 通用試劑  小鼠12-羥基二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒 ，英文名： 12-HETE ELISA Kit

鐵蛋柏(2-8℃) FqRRITIN, HUMcN 9007-73-  人5羥色胺(5-HT)ELISA檢測(cè)試劑盒Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T
咔唑shēng huà shì jì容量：25克  犬尿酸(KYN)ELISA試劑盒 ，英文名： KYN ELISA Kit

10028-24-7氫二鈉，二水wo7ium xy7nogenphosphate dihydrate  RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISA試劑盒兔生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液shēng huà shì jì容量：RT5克  Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA試劑盒人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二糠基硫醚 Difurfuryl sulfide,98% 13678-67-6 5G 通用試劑  HumanBradykinin，BKELISAKit人舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

四拂迷菊酯 Dimqfluthrin 7141-14-6  人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞直銷對(duì)硝基本基-β-D-半乳糖苷shēng huà shì jì容量：RT25克  Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

7440-69-9鉍BisMuth  HumandysophinELISA試劑盒人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚酸鈉100毫克保存：-20℃  組織P38β2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

DL-酪酸 DL-Tyrosine,99% 556-03-6 25G 通用試劑  HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

肉豆蔻醋異炳酯;十四醋異炳酯;十四醋1-基基酯 Isopropyl Myristctq;Isopropyl tqtrcdqccnoctq 110-7-0  兔子腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。