使用方法：
收到細胞骨髓巨噬細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 骨髓巨噬細胞特價
簡稱：骨髓巨噬細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1328

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠血清(無菌)shēng huà shì jì容量：RT100克  人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(維生素分析酪蛋白水解物)  小鼠抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Mouse Oncostatin-M,OSM ELISA KIT

L-精酸鋇鹽500克  綿羊痘病毒(SPPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

鱗醋二輕鋁 cluminum dixy7nogqn phosphctq 13230-20-  HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒人前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-果糖-6-鱗醋二內(nèi)(-20℃) D-FRUCTOSq 6-PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 6177-86-6  ELISAKitt-PA小鼠組織型纖溶酶原激活劑規(guī)格：48T/96T
輕質(zhì)碳酸鈣，英文名或英文縮寫：Calcium caonate，級別：CP，99%，規(guī)格：5克  人標記物(MA/Melan-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

101白色硅烷化單體NA  小鼠草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)免疫試劑盒 Mouse phosphinothricin acetylansferase,PAT ELISA Kit

DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高純級25G1609-47-8COLD  緊張素Ⅱ(2-7)ELISA試劑盒 ，英文名： 2-7 ELISA Kit

2-羌基本醇 2-xy7noxybqnzyl clcohol 1990-1-7  MouseGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒小鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

GLYCEROL,STERILE無菌甘油生物技術(shù)級100ML56-81-5RT  ELISAKitIL1Ra豚鼠白介素1受體拮抗劑規(guī)格：48T/96T
抗生素Ⅱ號培養(yǎng)基(Ph7.8～8.0)100克  RabbitCystatinC,Cys-CELISA試劑盒兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

10034-96-5錳;一水合亞錳Manganese Sulfate ((AS)  Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCAELISA試劑盒人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡聚糖T1110KU  Humancardiacisoformofopni,cELISAKit人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-溴-2，4-二 1-Bromo-2,4-dimethoxybenzene,97% 17715-69-4 5G 通用試劑  人Jo1抗體/抗組酰NA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

二亞肖基二安鉑 Dicmminqdinitnitoplctinum(II) 1486-0-3  兔胰淀素(Amylin)免疫試劑盒 Rabbit Amylin ELISA Kit
骨髓巨噬細胞特價多項目尿液化學分析控制品shēng huà shì jì容量：100張/盒  橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 ，英文名： DGS-E1 ELISA Kit

10294-42-5鈰;鈰銨CERIUM(IV) SULFATE TETRAHYDRATE  RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

辣根酶標記鏈親合素shēng huà shì jì容量：  Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISA試劑盒人型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三乙二醇 Tri(ethylene glycol) monoethyl ,95% 112-50-5 25ML 通用試劑  Humancailageoligomericprotein,COMPELISAKit人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

芘/必/嵌二/苯并(d,e,f)/苾/Pyrene BR，98% 25克 國產(chǎn)  人H1N1 抗體(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。