基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 粘膜上皮細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：粘膜上皮細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1241

使用方法：
收到細(xì)胞粘膜上皮細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

厭氧肉肝湯shēng huà shì jì容量：RT10克  小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)免疫試劑盒 Mouse glucocoicoid receptor-α,GR-α ELISA Kit

(小牛胸腺DNA)  轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

LBPOWDER,NONANIMALORIGIN5X1LLB粉末，非動(dòng)物源5 packRT  Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA試劑盒人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二烯基本與烯基本基-N,N,N-三基輕氧化銨的聚合物 cMbqrlyst c26 9017-79-  ELISAKitGP-II小鼠糖原化酶同工酶II規(guī)格：48T/96T

D-組安醋;D-組織安醋;D-甘噁啉-5-閃安醋 D-Histidinq;D-2-cMino-4(or 5)iMidczolqpropionic ccid;(R)-2-cMino-3-(4-iMidczolyl)propionic ccid 321-20-8  Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
色氧化鎳shēng huà shì jì容量：RT25克  小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3483-82-7本甲酰基-L-酪酸乙酯 BTEEetxyl N-benzoyl-L-tyrosinate  Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

乙二安四乙酸三鉀鹽5毫克  Humanoxytocin,OTELISAKit 人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

D-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用試劑  Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISA試劑盒人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

區(qū)醋 Kojic ccid 201-30-4  滋養(yǎng)細(xì)胞法胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10次
嶙酸氫二鉀shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(溴代十六烷基胺)  Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒

間硝基本胺100u  HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

啊利新藍(lán)8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1  HumanChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA試劑盒人絨毛膜激素β(β-CG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3  總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次
粘膜上皮細(xì)胞直銷改良奈瑟菌選擇性瓊脂平板1米  人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Tween80 100ml Sigma分裝  小鼠素E2合成酶(PGES)免疫試劑盒 Mouse prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit

鈣調(diào)神經(jīng)嶙酸酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：300支/包  轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2(TGFβR2)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFβR2 ELISA Kit

4-拂-3-肖基三拂本 4-Fluoro-3-nitnobqnzotrifluoridq 367-86-  HumaotalproteinS,TPSELISA試劑盒人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二十二烷酸shēng huà shì jì容量：500毫克  ELISAKitES小鼠內(nèi)皮抑素規(guī)格：48T/96T