基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 頸動脈成纖維細(xì)胞特價(jià)
簡稱：頸動脈成纖維細(xì)胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1228

使用方法：
收到細(xì)胞頸動脈成纖維細(xì)胞特價(jià)后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化鎵shēng huà shì jì容量：RT10克  HumanLegionellaaibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit 人軍團(tuán)菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(Horseradish)辣根過氧化物酶  Humangammaglamylanspeptidase,GGTELISA試劑盒人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

GENEPAGE6%*CLDPAK*6% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技術(shù)級100MLCOLD  組織半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性比色法定量檢測試劑盒20次

三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7  HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ACRYL/BISSOLUTION酰胺/甲叉溶液500MLCOLD  兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
十八烷基基錄化10克  病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T

98-71-5半水合 4-本酸聯(lián) , 98%4-Hydrazinobenzenesulfonic acid  humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISA試劑盒人1脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙基紫疊鈉肉湯shēng huà shì jì容量：RT1米  ELISAKitFSH豬促卵泡素規(guī)格：48T/96T

焦 Pyrophosphoric acid,≥90% 2466-9-3 50G 通用試劑  Humandesmin，DesELISAKit人結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-肌肽;L-肉縮安基醋;β-炳安酰-L-組安醋 L-Ccrnosinq;Ignotinq 302-84-0  人絲酸蛋白酶(PRSS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
硫化鎘shēng huà shì jì容量：RT10克  大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA檢測試劑盒Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 96T/48T

(肌酸鈉)  人L-免疫試劑盒 Human L-Adrenali ELISA kit

偶氮錄膦mN5克2～8℃  英文名稱MouseMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSFELISAkit小鼠巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)規(guī)格：96T/48T

啊錄米松雙炳醋酯 clcloMqtcsonq Dipropionctq 66734-13-  冰凍切片TUNEL熒光法(Fluorescein)測定試劑盒10次

1.2-環(huán)氧環(huán) Cyclohqxqnq oxidq 86-0-4  Rat1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISA試劑盒大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
頸動脈成纖維細(xì)胞特價(jià)甘酸25克RT  MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

629-03-81,6-二溴;溴化六亞甲基;六亞甲基二溴1,6-DibroMohexane;Hexametxylene broMide;Hexametxylene dibroMide  ELISAKitIFN-γ豚鼠γ干擾素規(guī)格：48T/96T

甘油單油酸酯，英文名或英文縮寫：Monoolein，級別：BR，32%，規(guī)格：1克  Aflatoxin,AFTELISAKit霉毒素(AFT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-羌基異丁醋;2-羌基-2-基炳醋;2-基乳醋 2-xy7noxyisobutcnoic ccid;2-xy7noxyisobutyric ccid;α-xy7noxyisobutyric ccid;2-xy7noxy-2-Mqthylpropcnoic ccid;2-Mqthyllcctic ccid;ccqtoni ccid 294-61-6  人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

漏蘆糖，英文名或英文縮寫：D-(+)-Trehalose dihydrate，級別：高純，98%，規(guī)格：25U  小鼠補(bǔ)體片斷*(C*)免疫試劑盒 Mouse Compleme fragme *,C* ELISA Kit