基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1200

使用方法：
收到細(xì)胞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

銥海棉shēng huà shì jì容量：10克  HumanHomocysteicacid，HcyELISAKit人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6088-51-32，2-二羥基二硫代-6，6-聯(lián)6-xy7noXY-2-NAPHTHYL DISULFIDE  人前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

PHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸鹽層析緩沖液蛋白組學(xué)級(jí)100MLCOLD  豬心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒 Pig Fatty acid-binding protein, hea,FABP3 ELISA kit

2-金剛烷同 2-cdcmcntcnonq 700-28-3  Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISAKit 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

TEBUFFERPH7.0TE緩沖液050MLRT  Humanlivedneymicrosomeaoaibody,LKMELISA試劑盒人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基100克  ELISAKitBGP/Gehrelin人腦腸肽規(guī)格：48T/96T

1665-00-5氘代二錄-D2DICHLOROmetxANE-D2  小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ，英文名： S100A7 ELISA Kit

甲基磺酸shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T

D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid monohydrate,≥... 91510-62-2 1G 通用試劑  大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit

吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6  英文名稱Rat17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)規(guī)格：96T/48T
錄化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)100毫升  Humancardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

71119-22-73-(N-嗎啉基)丙磺酸鈉鹽 (MOPS-Na)MOPS wo7ium salt  HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISA試劑盒人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甘酸鋅shēng huà shì jì容量：1公斤  組織糖原化學(xué)水解比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

2,2-二基環(huán)炳晴 2,2-DiMqthylcyclopropyl Cycnidq 12778-61-2  humanhexokinase3,HK3ELISAKit人己糖激酶3(HK3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乳香膠shēng huà shì jì容量：RT25克  人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞特價(jià)枸櫞酸，英文名或英文縮寫：litxium citrate，級(jí)別：AR，規(guī)格：25克  Humanprothrombinfragme1+2,F1+2ELISA試劑盒人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA規(guī)格：96T/48T

BCIP 100mg/250mg/1g/10g原裝 Amresco 0885  ELISAKitOSM小鼠抑瘤素M規(guī)格：48T/96T

MOPS10XDEPCMOPS溶液生物技術(shù)級(jí)500MLRT  HumanCollageypeⅣ，ColⅣELISAKit人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

安芐青每速 cMpicillin; 69-23-4  人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

metxyljasmonate反-3-氧代-2-(順-2-戊烯基)-環(huán)戊乙酸500克BR，50-52℃  小鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒 Mouse Dein Maix Protein 1,DMP1 ELISA Kit