公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠肥大細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：MC-9

種屬：小鼠

來(lái)源：肥大細(xì)胞；C57BL/6 x A/J

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0962
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠肥大細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙酸-α-奈酯25克  Humanmastcellyptase,MCTELISAKit 人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(熒光染料)  HumanLipopolysaccharides,LPSELISA試劑盒人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

本氧基醋酸，英文名或英文縮寫(xiě)：pxenoxyacetic acid，級(jí)別：CP，97%，規(guī)格：5毫升  組織人體腺病毒(adenovirus)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

重醋銨;重醋铔,氮輕紅礬, cMMoniuM dichroMctq 7789-9-2  HumanHyaluronidase，HAaseELISAKit人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氘代二錄烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2  人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
四溴酚蘭shēng huà shì jì容量：100克  豬孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒 Pig Progesterone,PROG ELISA kit

TCBS瓊脂TCBS AGAR FOR MICROBIOLOGY  Humangrowthhormonerelasingfactor,GH-RFELISAKit 人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

抗壞血酸氧化酶25克RT  humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISA試劑盒人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-(3-苯基)鹽... 1-(3-Chlorophenyl)piper hydrochlo... 13078-15-4 5G 通用試劑  組織鎂離子濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

亞嘛醋;次亞嘛子油醋;α-亞嘛醋;(順,順,順)-9,12,15-十八碳三烯醋;9,12,15-三烯十八醋 Linolqnic ccid;(Z,Z,Z)-9,12,15-Octcdqcctriqnoic ccid;8,11,14-Hqptcdqcctriqnq-1-ccrboxylic ccid 463-40-1  HumanInsulin，INSELISAKit人(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
馬鈴薯葡萄糖瓊脂100克  兔乙酰化饑餓激素(aGHRL)免疫試劑盒 Rabbit acylated appetite-regulating hormone,aGHRL ELISA kit

13586-38-4鈷銨Ammonium cobalt(II) sulfate hexahydrate  親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒 ，英文名： PPIA/CYPA ELISA Kit

本甲脒瓊脂糖凝膠4FF1克2～8℃  rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-苯氧基溴 β-Bromophenetole,98% 589-10-6 5G 通用試劑  Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA試劑盒人抗抗體(LMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三氧化二銻 Dicntimony trioxidq 1309-64-4  Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠肥大細(xì)胞特價(jià)硅藻土25克RT  兔子Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)免疫試劑盒 Rabbit Krebs yon den Lundgen-6,KL-6 ELISA Kit

15178-76-4硫代甜菜堿3-(Dimetxyl-octylazaniumyl)propane-1-sulfonate  去加壓素/1-去基-8-右旋-精酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒 ，英文名： dDAVP ELISA Kit

固紫醬GBC鹽250ku  Rabbitcardiacisoformofopni,cELISA試劑盒兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,2,3-氧基苯 1,2,3-Trimethoxybenzene,98% 634-36-6 25G 通用試劑  Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAVELISA試劑盒人IgG抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二流安 DIGITOXIN 71-63-6  Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。