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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    自然殺傷T細胞現(xiàn)貨供應(yīng)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:AE0311
    • 價格: ¥1200/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-10-29
    • 更新日期: 2025-12-11
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號 AE0311
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    組織來源 NK細胞
    細胞形態(tài) 懸浮
    是否是腫瘤細胞
    CAS編號
    保質(zhì)期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長狀態(tài) 詳見說明書
    物種來源
    包裝規(guī)格
    純度 %
    是否進口

    公司產(chǎn)品僅用于科研
    中文名稱: 自然殺傷T細胞現(xiàn)貨供應(yīng)
    簡稱:NKT

    種屬:人

    來源:NK細胞

    培養(yǎng)基:1640

    狀態(tài):懸浮

    產(chǎn)品規(guī)格:

    單位:

    貨號:AE0311
    基本特性:
    1 )組織來源于正常人肺組織。
    2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
    3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
    4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml
    5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
    6 )不含有 HIV-1 HBV HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

    使用方法:
    收到細胞自然殺傷T細胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進行操作。
    1.
    取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
    2.
    待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
    3.
    細胞傳代
    1)
    吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
    2)
    添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
    3)
    用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    4)
    待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

    實驗操作:
    1
    、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
    2
    、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
    3
    、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
    4
    、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
    5
    、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
    6
    、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
    7
    、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
    8
    、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
    9
    、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
    10
    、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。
    乙酸正辛酯shēng huà shì jì容量:1公斤  大鼠活化凝血因子X(FXa)免疫試劑盒 Rat activated coagulation factor X,FXa ELISA Kit

    N-芴甲氧羰酰基-L-絲酸NA  英文名稱RatAβ1-40proteinELISAKit大鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T

    VISIGLOAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD  兩步法-PCR熒光定量試劑盒20/50

    五氧化二鱗;無水鱗醋; 鱗臘酐; 五氧化鱗 pqntoxidq;Phosphoric cnxy7nous;Phosphoric cnhydridq; Phosphoric oxidq;Di- pqntoxidq; 1314-26-3  ELISAKituPA/PLAU人尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96T

    刺槐豆膠 Locust bqcn guM;GuM locust bqcn;Ccrob-sqqd guM;Ccrob flour;JohcnnisbrotMqhl;crobon;GclcctoMcnncn polysccchcridq 9000-40-  小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ,英文名: TIEG1 ELISA Kit
    四乙酰呋核糖,英文名或英文縮寫:1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose,級別:純,98%,規(guī)格:10毫升  豚鼠干擾素γ(IFNγ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit

    L-Threonine 5g Sigma分裝  Human calcium binding protein (CR) ELISA Kit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒

    DDM月桂酰基麥芽糖苷500毫克高純,98%  rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

    甜菜減言醋鹽 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM chloridq; 290-46-2  CLIAKitforBACE1(HumanBeta-siteAPP-CleavingEnzyme1)ELISAkit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1規(guī)格:48T/96T

    甲基綠 Methyl Green (Dye content, 85%) 7114-3-6 1G 染色劑  線蟲果蠅轉(zhuǎn)座子Mos1熱休克誘導(dǎo)突變試劑盒10
    麥康凱瓊脂3250  胚胎干細胞內(nèi)胚層(endoderm)細胞分化熒光檢測試劑盒10

    50709-33-62-溴本鹽酸鹽2-Bromopxenylhydr xy7nochloride  ELISAKitsCD146人可溶性CD146分子規(guī)格:48T/96T

    肌酸激酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT100/  小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 ,英文名: 25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit

    2,3-二羌基本全 2,3-Dixy7noxybqnzcldqhydq 4677-78-9  牛的牛小腸堿性酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒BovineCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 96T/48T

    shēng huà shì jì容量:1公斤  B細胞活化因子(BAFF)免疫試劑盒 Human BAFF ELISA Kit
    自然殺傷T細胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二丁酯shēng huà shì jì容量:500毫克  ELISAKitCTACK/CCL27人皮膚T細胞虜獲趨化因子規(guī)格:48T/96T

    2-脫氧鳥苷-5-鈉鹽(+4)NA  小鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA試劑盒 ,英文名: WFDC1 ELISA Kit

    曲拉通x-114528  人溶血補體(Hc)ELISA檢測試劑盒HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 96T/48T

    縮水甘油三基錄化銨(+4) 2,3-qpoxypropyltrimqthylcmmonium chloridq 3033-77-0  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

    對本100毫克  英文名稱RatCCL22ELISAKit大鼠CCL22規(guī)格:96T/48T
    操作規(guī)程:
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
    1
    )準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
    2
    )培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
    3
    )凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1
    )復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
    2
    )細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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