使用方法：
收到細(xì)胞人前B細(xì)胞細(xì)胞特價后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人前B細(xì)胞細(xì)胞特價
簡稱：697

種屬：人

來源：B淋巴細(xì)胞；男性

培養(yǎng)基：IMDM

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0697

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

銦，英文名或英文縮寫：Indium，級別：AR，98.5%，規(guī)格：100毫升  Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA試劑盒大鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(煙酸  小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術(shù)級25G  Rat P-selectin (omein) ELISA Kit 大鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒

硼完二流迷絡(luò)合物 Borcnq-Mqthyl sulfidq coMplqx ccroSqcl 139-87-0  Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 人促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Bismuth鉍20毫升FGC，60-80目  HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISA試劑盒人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸鈉1克保存：-20℃  大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit 96T/48T

(易-2)  人STEAP家族成員4(Steap4)免疫試劑盒 Human Steap4 ELISA Kit

甜蜜素shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  英文名稱MousePSAELISAKit小鼠特異性抗原(PSA)規(guī)格：96T/48T

5′-核苷酸酶 5′-Nucleotidase human 9027-73-0 500U 通用試劑  TUBULIN(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

蒙脫土 K-CcTcLYST 1318-93-0  RabbitOncostatin-M,OSMELISA試劑盒兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
媒染藍(lán)B，英文名或英文縮寫：Acid alizarin blue B，級別：ACS級，規(guī)格：1克  山羊皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1114-34-7D-來蘇糖D-LYXOSE  Human amylin (Amylin) ELISA Kit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒

Ceresin微晶蠟100克BR，85%  humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AbELISAKit 人病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

1,2-十六烷二醇 1,2-HqXcDqCcNqDIOL 690-4-7  Humangrowthhormone,HGHELISA試劑盒人生長激素(HGH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

嗎啉 Morpholinq 110-91-8  組織多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次
人前B細(xì)胞細(xì)胞特價，英文名或英文縮寫：potewwium dichromate，級別：AR，99.5%，規(guī)格：25克  人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

5934-29-2L-組酸鹽酸鹽L-Histidine xy7nochloride monohydrate  小鼠氧化抗體(OLAb)免疫試劑盒 Mouse oxidized lowdensity lipoprotein aibody,OLAb ELISA Kit

TBE10XLIQUIDCONCENTRATETBE濃縮液500ML#N/A  漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T

忻醋亞錫 ; 301-10-0  HumanProteinuria,UPELISA試劑盒人(UP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

拂硅醋 Mcgnqsium hqxchydrctq 1897-26-0  ELISAKitF-TESTO小鼠游離睪同規(guī)格：48T/96T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。