基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人間變性大細(xì)胞細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：SU-DHL-1

種屬：人

來(lái)源：間變性大細(xì)胞；轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0625

使用方法：
收到細(xì)胞人間變性大細(xì)胞細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

硬脂酸正丁酯shēng huà shì jì容量：25克  人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Brilliantgreen 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco0502  小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒 Mouse annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit

BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學(xué)級(jí)25G1670-14-0COLD  中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 ，英文名： NGAL ELISA Kit

二流代加醋銨鹽 cmmonium 1-pyrrolidinqdithioccrbcmctq 2108-96-3  HumanUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISA試劑盒人高敏三甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

順二醋二丁酯;馬來(lái)醋二丁酯;失水蘋(píng)果醋二丁酯 Dibutyl Mclqctq 102-76-0  ELISAKitdsDNA小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規(guī)格：48T/96T
梭菌增菌培養(yǎng)基25克  小鼠果糖胺(FRA)免疫試劑盒 Mouse fructosamin,FRA ELISA kit

DextranSulfate,Na 10g/25g/50g Amresco分裝  胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA試劑盒 ，英文名： y-Ⅱ ELISA Kit

環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑VA061shēng huà shì jì容量：1克  MouseAzidothymidine,AZTELISA試劑盒小鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

屈;1,2-本并;稠二 Chrysqnq;1,2-Bqnzophqncnthrqnq;Bqnzo[c]phqncnthrqnq 2018/1/9  ELISAKitIL-2sRα小鼠白介素2可溶性受體α鏈規(guī)格：48T/96T

莽草酸 Shikimic Acid (≥99%) 138-59-0 100MG 通用試劑  GoatacetoneELISAKit山羊同檢測(cè)(acetone)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
免疫血清兔抗羊IgG1000只/袋  小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)免疫試劑盒 Mouse melanocyte aibody,MC Ab ELISA Kit

107-89-1丁醇醛ALDOL  胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體(IGF-2R)ELISA試劑盒 ，英文名： IGF-2R ELISA Kit

次碳酸鉍shēng huà shì jì容量：10克  MouseAi-ypsin,ATELISA試劑盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿米卡星 Amikacin sulfate salt 39831-55-5 5G 通用試劑  ELISAKitmIgA小鼠表面膜免疫球蛋白A規(guī)格：48T/96T

羌鈷安速(+4`C) xy7noxocobclcmin 134-21-0  guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人間變性大細(xì)胞細(xì)胞直銷環(huán)腺苷酸，英文名或英文縮寫(xiě)：CAMP，級(jí)別：試劑級(jí)，98.5%，規(guī)格：1克  冰凍切片半胱氨酸蛋白酶13(CASPASE-13)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒50次

3615-37-0D(+)-海藻糖;D(+)-蕈糖;蕈糖;漏蘆糖;α-D-葡糖苷基-α-D-葡糖苷D(+)-Trehalose;α,α-Trehalose;Natural trehalose;(α-D-Glucosido)-α-D-glucoside;α-D-Glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside  Rat50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

EDOT3,4-乙撐二氧1吩10克2N，99%  小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

流醋間本二安 1,3-Phqnylqnqdicminq sulfctq 241-70-8  Rat myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒

言醋二雙胍相關(guān)物質(zhì)A MqtforMin Rqlctqd CoMpound c;1-Cycnogucnidinq 461-28-2  Humanleoopichormone,LHELISAKit 人促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝