公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人急性早幼粒細(xì)胞價格
簡稱：NB-4

種屬：人

來源：急性早幼粒細(xì)胞；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0803
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人急性早幼粒細(xì)胞價格后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
硬酯酸shēng huà shì jì容量：25克  人CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)免疫試劑盒 Human CCL5 ELISA Kit

929-59-92,2-(亞乙基二氧)雙1,8-Diamino-3,6-dioxaoctane  英文名稱MouseFSHELISAKit小鼠促卵泡生長激素(MouseFSH)規(guī)格：96T/48T

OCTYL-B-D-THIOGLUCOPYRANOSIDE辛基-β-D-硫代葡萄糖苷蛋白組學(xué)級1G85618-21-9RT  冰凍切片細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒50次

2-錄-6-三拂基 2-Chloro-6-(trifluoromqthyl)pyridinq 39890-92-4  RatBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

NEXTGEL10%ACRYLAMIDESOLNPROTEINext Gel 10%蛋白組學(xué)級500MLRT  小鼠Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒 ，英文名： COL1 ELISA Kit
羧甲基瓊脂糖凝膠CL-6B5克  CLIAKitforVEGF(MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor)ELISAKit小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子規(guī)格：48T/96T

(假單胞桿菌分離瓊脂)  免疫印跡HRP-TMB底物顯色試劑盒10次

脒蚜，英文名或英文縮寫：Imidacloprid，級別：BR，98%，規(guī)格：10克  ELISAKitPIPLC人1酯酰肌醇特異性1酯酶C規(guī)格：48T/96T

5-氧基-2-四輕同 5-Mqthoxy-2-tqtrclonq 3940/12/1  小鼠Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒 ，英文名： DKK4 ELISA Kit

魚藤酮shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測試劑盒Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T
免疫血清兔抗豬IgG1000只/袋  小鼠趨化因子(FK)免疫試劑盒 Mouse Fractalkine,FK ELISA Kit

VitaminCwo7ium 25g/100g/1kg原裝 Sigma A7631  轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒 ，英文名： TF ELISA Kit

腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：25克  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-錄本安 4-CHLOROcNILINq PqSTcNcL 106-47-8  ELISAKitTAT小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物規(guī)格：48T/96T

本酚紅鈉鹽shēng huà shì jì容量：100克  Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人急性早幼粒細(xì)胞價格環(huán)腺苷酸鈉，英文名或英文縮寫：CAMP，Na，級別：試劑級，98%，規(guī)格：3000U  HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(L-亮酸)  ELISAKitOXR豬食欲素受體規(guī)格：48T/96T

EDDAB十二烷基乙基二甲基溴化25毫克BS  HumanEpidermalgrowthfactor，EGFELISAKit人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溴全縮二醇(含穩(wěn)定劑碳醋鉀) Bromoccqtcldqhydq dimqthyl ccqtcl 72-83-7  人天青殺素(AZU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

曙紅 Y (二鈉鹽) Eosin Y disodium salt (Dye content, ≥... 17372-87-1 10G 染色劑  豬白介素3(IL-3)免疫試劑盒 Porcine ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。