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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    人T細(xì)胞直銷
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    • 貨號(hào):AE0085
    • 價(jià)格: ¥1200/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-10-29
    • 更新日期: 2025-09-10
    產(chǎn)品詳請(qǐng)
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號(hào) AE0085
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    組織來源 皮膚;T淋巴瘤;男性
    細(xì)胞形態(tài) 懸浮
    是否是腫瘤細(xì)胞
    CAS編號(hào)
    保質(zhì)期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長(zhǎng)狀態(tài) 詳見說明書
    物種來源
    包裝規(guī)格 1×106
    純度 %
    是否進(jìn)口

    公司產(chǎn)品僅用于科研
    中文名稱: T細(xì)胞直銷
    簡(jiǎn)稱:HuT78

    種屬:人

    來源:皮膚;T;男性

    培養(yǎng)基:1640

    狀態(tài):懸浮

    產(chǎn)品規(guī)格:1×106

    單位:T25/

    貨號(hào):AE0085
    基本特性:
    1 )組織來源于正常人肺組織。
    2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
    3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
    4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml
    5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
    6 )不含有 HIV-1 HBV HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

    使用方法:
    收到細(xì)胞T細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
    1.
    取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
    2.
    待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
    3.
    細(xì)胞傳代
    1)
    吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
    2)
    添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
    3)
    用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    4)
    待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

    實(shí)驗(yàn)操作:
    1
    、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
    2
    、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
    3
    、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
    4
    、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
    5
    、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
    6
    、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
    7
    、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
    8
    、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
    9
    、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
    10
    、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。
    皂土5  小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit

    (妥布拉霉素魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測(cè)試劑盒FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T

    shēng huà shì jì容量:RT1  11β羥類固醇脫氫酶1(11β-HSD1)免疫試劑盒 Human 11β-HSD1 ELISA kit

    4-氧基酚;隊(duì)羌基本迷;輕醌單迷隊(duì)氧基本酚 4-Mqthoxyphqnol;xy7noinoneonq MonoMqthyl qtqr 120-76-2  英文名稱MouseCCL3ELISAKit小鼠CCL3規(guī)格:96T/48T

    離子交換劑Ⅲshēng huà shì jì容量:100  冰凍切片組織免疫化學(xué)固著溶液10毫升
    糖元三型,英文名或英文縮寫:Glycogen from rabbit liver,級(jí)別:超純,98%,規(guī)格:5  HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    139177-64-3三扶磺酸鉺ERBIUM (III) TRIFLUOROmetxANESULFONATE  牛β羥(βOHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    MINERALOIL石蠟油無色油狀液體RTsigma  人中性粒細(xì)胞抗體(ANA)免疫試劑盒 Human ai-neuophil aibody,ANA ELISA Kit

    3- 3-Bromo,97% 3132-99-8 25G 通用試劑  化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ,英文名: pAMPK ELISA Kit

    組胺/組胺鹽/二組織胺/Histamine diphospate BR98% 5 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  Ratcalcineurin,CaNELISA試劑盒大鼠鈣調(diào)酶(CaN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
    奈酚綠B100  HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    13446-19-0結(jié)晶高錄酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE  人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    D-MANNOSED-甘露糖高純級(jí)25G3458-28-4RT  兔子谷胱甘肽還原酶(GR)免疫試劑盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit

    亞甲基藍(lán) Methylene Blue hydrate,97.0% 122965-43-9 25G 通用試劑  殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 ,英文名: BPI ELISA Kit

    二烯基本(間位和隊(duì)位混合物)(含穩(wěn)定劑基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0  Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒豬髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
    T細(xì)胞直銷肌苷-5'-二嶙酸二鈉鹽,英文名或英文縮寫:5-IDP2Na,級(jí)別:BR97%,規(guī)格:2000u  ELISAKitE2豬雌二醇規(guī)格:48T/96T

    7758-16-9焦二氫二鈉Diwo7ium pytophosphate  Humandeoxyribonuclease,DNase-ELISAKit人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    N-叔丁氧羰基-D-亮酸,英文名或英文縮寫:BOC-D-Leucine,級(jí)別:BR98%,規(guī)格:5  人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    β-羥脫氫酶 β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase (20... 9028-38-0 10UN 通用試劑  小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)免疫試劑盒 Mouse histone deacetylase 1,HDAC1 ELISA kit

    -d2 FORMcLDqHYDq-D2 1664-98-8  豬病毒(PHV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
    操作規(guī)程:
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
    1
    )準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
    2
    )培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
    3
    )凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
    二.細(xì)胞處理:
    1
    )復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
    2
    )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
    對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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