使用方法：
收到細胞小鼠B細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 小鼠B細胞特價
簡稱：38C13

種屬：小鼠

來源：B；C3H/eB

培養基：1640

狀態：半貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE01111

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

制霉菌素檢定培養基shēng huà shì jì容量：RT支  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit人相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規格：96T/48T

N-芴甲氧碳酰基-2.2.4.6.7-五甲基二氫本并呋-5-磺酰-L-精胺酸NA  豚鼠雌激素(esogen)ELISA試劑盒 ，英文名： esogen ELISA Kit

TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學級100G5704-4-1RT  Human epidermal growth factor (PTN) ELISA Kit 人多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒

(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1  rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

標樣 Lqcd 7439/9/1  CLIAKitforBeta-glucosidase(MouseBeta-glucosidase)ELISAKit小鼠β葡糖苷酶規格：48T/96T
土當歸酸，英文名或英文縮寫：Oleanolic acid，級別：CP，60-80目，規格：100克  CLIAKitforBAX(HumanBcl-2associatedXprotein)ELISAKit人Bcl-2相關X蛋白規格：48T/96T

3913-67-5N-甲基-L-酸N-metxyl-L-alanine  線蟲M9緩沖液500毫升

PCRMARKERWITHLOADINGDYEPCR Marker, 含上樣緩沖液生物技術級500 lFrozen  rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

(1R)-(+)- (1R)-(+)-cLPHc-PINqNq 7782-70-8  豚鼠神經蛋白聚糖(NCAN)ELISA試劑盒 ，英文名： NCAN ELISA Kit

典化 Lqcd(II) iodidq 10101-63-0  Human low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒
牛胰島素，英文名或英文縮寫：Insulin(bovine pancreas)，級別：精制級，50u/mg，規格：250ku  HumanAndrostenedione,ASDELISAKit 人雄(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

姆沙伯W/AW-DMCSCHROMOSORB W/AW-DMCS  HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISA試劑盒人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

L-α-基-β-羥基，英文名或英文縮寫：L-Threonine，級別：BR，99%，規格：10克  組蛋白轉甲基酶活性檢測試劑盒(H3-K4)20次

BOC-L-天門冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用試劑  HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit人復制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒規格：96T/48T

流醋亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;流醋低鐵銨;六水合流醋亞鐵銨;流醋亞鐵銨;六水合流醋鐵銨;六水合流醋鐵(Ⅱ)銨 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9  小鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠B細胞特價甲基百里香酚藍，英文名或英文縮寫：MTB，級別：高純，99%，規格：350ku  小鼠前列環素(PGI2)免疫試劑盒 Mouse prostacycline,PGI2 ELISA Kit

7562-61-0D-地衣酸(+)-Usniacin  轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit

Cobaltousacetatetetrahydrate乙酸亞鈷5克BR，99%  Humanansferfactor,TFELISA試劑盒人轉移因子(TF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

雌同3-(Beta-D-葡糖苷醋)內鹽 1,3,5[10]-qSTRcTRIqN-3-OL-17-ONq 3-GLUCURONIDq wo7ium ScLT 12087-01-1  ELISAKitET-1小鼠內皮素1規格：48T/96T

1，3，5-三嗪-2，4，6-三安 Mqlcminq 108-78-1  Humanai-parotidductaibodyELISAKit人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)ELISA試劑盒規格：96T/48T

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。