基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞直銷
簡稱：RAW264.7

種屬：小鼠

來源：單核巨噬細(xì)胞；雄性；BALB/c

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：半貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0231

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

質(zhì)粒提取試劑盒10片/箱  冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10次

(D-核糖)  RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISA試劑盒大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丙二shēng huà shì jì容量：50毫升  小鼠CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒 ，英文名： FKN/CX3CL1 ELISA Kit

膽醋 Cholic ccid 1981/2/4  魚類白介素1α(IL-1α)ELISA檢測試劑盒FishIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T

羥基脲 Hydroxyurea (≥98%, TLC, powder) 127-07-1 1G 通用試劑  犬組胺(HIS)免疫試劑盒 Canine Histamine,HIS ELISA Kit
吐混85，英文名或英文縮寫：Tween 85，級別：BR，規(guī)格：500毫克  絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒 ，英文名： Serpina3g ELISA Kit

63231-63-0核糖核酸　酵母(+4℃)Ribonucleic acid  Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

花寶2號，英文名或英文縮寫：N-P-K，級別：超純，99%，規(guī)格：5毫克  GuineapigGrowthhormone,GHELISA試劑盒豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乳酸鏈球菌素 Nisin from Lactococcus lactis 1414-45-5 5G 通用試劑  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去輕孕同 Dydrogqstqronq 2012/6/2  人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛胰島素shēng huà shì jì容量：RT25克  HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISA試劑盒人緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4387-36-4鄰本2-Iodobenzonitnile  Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

頭孢菌素C鋅鹽shēng huà shì jì容量：5克  人α-突觸核蛋白(a-Synuclein)ELISA試劑盒 組裝/原裝

2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑  兔子補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒 Rabbit Compleme 5,C5 ELISA Kit

二忻基本基鱗醋酯 DIOCTYL PHqNYLPHOSPHONcTq 1724-47-8  溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA試劑盒 ，英文名： lyso-PAF ELISA Kit
小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞直銷甲基本基酮，英文名或英文縮寫：Acetopxenone，級別：色標(biāo)，99%，規(guī)格：100克  Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人維生素D2(VD2)ELISA試劑盒

2133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2,4-Dixy7noxy-6-metxylbenzoicacid2,4-二羥-6-甲基本酸500克AR，99%  Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISA試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,1,2-三錄三拂烷;1,1,2-三拂-1,2,2-三錄烷 1,1,2-Trichlorotrifluoroqthcnq 76-13-1  桌面DNA清除溶液500毫升

麥芽四糖 Mcltotqtrcosq 3461-38-9  Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T