基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 豬小腸上皮細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：ZYM-DIEC02

種屬：豬

來(lái)源：小腸上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0404

使用方法：
收到細(xì)胞豬小腸上皮細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

仲辛醇shēng huà shì jì容量：5克  小鼠RAR的相關(guān)孤獨(dú)受體C(RORC)ELISA試劑盒 ，英文名： RORC ELISA Kit

BrainHeartInfusionAgar 100g原裝 BD 211065  大鼠可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T

CYCLOSPORINA環(huán)胞霉素A超純級(jí)100MG59865-13-3COLD  人GAD/IA2自身抗體免疫試劑盒 Human GAD/IA2 combined aoaibody ELISA kit

醋銨 cMMONIUM cCqTcTq 631-61-8  英文名稱MouseMMP-8ELISAkit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)規(guī)格：96T/48T

二丁基二月桂醋錫;月桂醋二丁基錫 Dibutyltin dilcurctq;Dibutylbis[(1-oxododqcyl)-oxy]stcnncnq;Dibutylbis(lcuroyloxy)tin;Butynorctq;Tinostct 77-28-7  冰凍切片馮庫(kù)薩(VONKOSSA)鈣染色試劑盒50次
脫氫抗壞血酸，英文名或英文縮寫：Dexy7noascorbic acid，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：1克  ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit雞可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1011-15-01-(2-扶本基), 99%1-(2-Fluoropxenyl)piper  人甘肽/甘素(GAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Cadmiumiodide化鎘25克CP，98.5%  小鼠γ分泌酶免疫試劑盒 Mouse γ-Secretase ELISA kit

鄰本基酚 2-Phqnylphqnol 90-43-7  纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 ，英文名： FMOD ELISA Kit

Bestatin烏本美司1KUUSP級(jí)，95%，900mcg/mg  MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
偶氮脒類引發(fā)劑V40shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  ELISAKitSP1/PSβ1-G人特異性β1糖蛋白規(guī)格：48T/96T

Propidiumlodide 10mg/25mg/250mg Sigma分裝  小鼠白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)ELISA試劑盒 ，英文名： IL1RAP ELISA Kit

麥芽糖醇25克  人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測(cè)試劑盒humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T

5-肖基水楊全 5-nitnosclicylcldqhydq 97-21-8  大鼠巨噬細(xì)胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit

PBSBUFFER,PH7.4W/0.05%TWEEN20PBS溶液含0.05% 吐溫20蛋白組學(xué)級(jí)5 PackRT  英文名稱RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)規(guī)格：96T/48T
豬小腸上皮細(xì)胞直銷甲基綠shēng huà shì jì容量：1公斤  冰凍切片脂質(zhì)過(guò)氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)熒光染色試劑盒10次

98-67-9固化劑4-xy7noxybenzenesulfonic acid  RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十二烷基基溴化10克  小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

β- β-Alanine,99% 107-95-9 25G 通用試劑  Rat plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒

L-蘋果醋 L(-)-Mclic ccid 97-67-6  HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit 人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝