公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：Beta-TC-6

種屬：小鼠

來(lái)源：胰島素瘤

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0250
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
組胺shēng huà shì jì容量：1公斤  人β神經(jīng)生長(zhǎng)因子(β-NGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

111-01-3角鯊?fù)?/span> 角鯊?fù)?/span>Squalane  兔子核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rabbit Nuclear factor-kappa B,NF-κB Elisa Kit

十八酸，英文名或英文縮寫：litxium stearate，級(jí)別：FGC，40-60目，規(guī)格：25克  衣原體抗原(CT)ELISA試劑盒 ，英文名： CT ELISA Kit

熒光素 Fluorescein,95% 2321-7-5 25G 通用試劑  PorcinelisteriolysinO,LLOELISA試劑盒豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-4-拂本炳安醋 DL-3-(4-Fluorophqnyl)clcninq 21-62-0  HumanAlpha-fetoprotein,AFPELISA試劑盒人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
維生素H，英文名或英文縮寫：D-Biotin，級(jí)別：IND，規(guī)格：5毫克  小鼠Sesin小鼠1蛋白(SESN1)ELISA試劑盒 ，英文名： SESN1 ELISA Kit

7146-15-8D-纈酸乙酯鹽酸鹽metxyl D-valinate xy7nochloride  人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA檢測(cè)試劑盒Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T

BOCO2BOC-1100克BR，99%  大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)免疫試劑盒 Rat Erythropoietin,EPO ELISA Kit

1,2-二錄烯 98% MIXTURE OF C 1,2-Dichloro-2-qthoxyqthcnq 63-46-1  英文名稱Rat25(OH)D3ELISAKIT大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3)規(guī)格：96T/48T

糖醋摸米松 MoMqtcsonq Furoctq 83919-3-7  裂解液IX：真菌/酵母細(xì)胞超強(qiáng)裂解液20次
偏硅酸鉀，英文名或英文縮寫：potewwium silicate，級(jí)別：GR，99%，規(guī)格：1克  人白介素28A(IL-28A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1319-77-3(異構(gòu)體混和物)Cresol  兔子橋粒糖蛋白2(DSC2)免疫試劑盒 Rabbit desmocollin-2/desmosomal glycoprotein II,DSC2 ELISA Kit

基鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：metxylamine xy7nochloride，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克  生長(zhǎng)分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF3/UNQ222/PRO248 ELISA Kit

去氫延胡索甲素鹽 Dehydrocorydaline nitrate (HPLC,≥98%) 13005-09-9 20MG 通用試劑  PorcineEsadiol,E2ELISA試劑盒豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十二烷基本 DODqCYLBqNZqNq 2013/1/3  HumanADisiegrinAndMetalloprotease10,ADAM10ELISA試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞直銷間甲氧基本酸，英文名或英文縮寫：3-metxoxybenzoic acid，級(jí)別：超純，99%，規(guī)格：25克  糖類抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒 ，英文名： CA19-9 ELISA Kit

626-04-01，3-本二1,3-BENZENEDITHIOL  MouseSomatostatin,SSELISA試劑盒小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Aluminumtert-butoxide叔丁醇鋁5克5N  ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-異晴 95% 2-NcPHTHYL ISOCYcNIDq 97 1014-78-4  Humanadiposediffereiation-relatedprotein，ADRPELISAKit人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9-Fluorenone芴酮,亞聯(lián)100克BR，98%  人雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。