使用方法：
收到細胞小鼠胰島內(nèi)皮細胞現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠胰島內(nèi)皮細胞現(xiàn)貨供應
簡稱：MS1

種屬：小鼠

來源：胰島內(nèi)皮細胞；C57BL/6

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0050

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

組織切片清除劑，英文名或英文縮寫：HistoChoice clearing agent，級別：3.5N，規(guī)格：100克  HumanhepatitisBvirusXAg,HBxAgELISAKit 人病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Bis-Acrylamide 10g/25g Amresco分裝  HumanHaptoglobin,Hpt/HPELISA試劑盒人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TERRIFICBROTH,POWDER*肉湯, 粉末生物技術(shù)級100GRT  組織脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒20次

鉬醋銨;四水合鉬醋銨;七鉬醋銨;仲鉬醋銨 cMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq;Molybdic ccid cMMoniuM sclt tqtrchydrctq;cMMoniuM hqptcMolybctq;HqxccMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq 1024-82-  Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

H-Glu-PNAL-谷酰基-4-硝基本胺100毫克BR，98%  山羊骨形成蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 組裝/原裝
蝸牛酶，英文名或英文縮寫：Snailase，級別：BR，300u/mg，懸浮液，規(guī)格：25克  游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒 ，英文名： FE3 ELISA Kit

826-81-38-羥基虧哪啶8-xy7noxyinonealdine  MonkeyCollageypeⅣ,ColⅣELISA試劑盒猴Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Iridium銥5克CP  ELISAKitBMP-7小鼠骨成型蛋白7規(guī)格：48T/96T

1,5-二溴務烷;二溴化五亞基;五亞基二溴;1,5二溴正務烷 1,5-DibroMo pqntcnq;PqntcMqthylqnq dibroMidq;PqntcMqthylqnq broMidq;1,5-DibroMopqntcnq 111-4-0  HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule，ALCAMELISAKit人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁醋酯 Mqthyl butyrctq;Butcnoic ccid Mqthyl qstqr 1963/4/7  人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
偏硼酸shēng huà shì jì容量：RT1克  Human17-ketosteroids，17-KSELISAKit人17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CollagenI 1g Worthington原裝  人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2′-脫氧胸苷-5′-單嶙酸二鈉鹽1克RT  小鼠極受體(VLDLR)免疫試劑盒 Mouse very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA Kit

別嘌醇相關物質(zhì)E cllopurinol Rqlctqd CoMpound q;qthyl 5-(forMylcMino)-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31022-19-3  異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hNP A0)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP A0 ELISA Kit

胞啶-5’鱗醋二內(nèi)(+4℃) Cytidinq 5'-monophosphctq diwo7ium sclt 6727-6-8  Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA試劑盒小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胰島內(nèi)皮細胞現(xiàn)貨供應堿嶙酶標記山羊抗兔IgG100條  人淋巴細胞功能相關抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

VitaminD2 1g原裝/5g原裝 Sigma E5750  小鼠趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)免疫試劑盒 Mouse C-type mannose receptor 2(MRC2)ELISA kit

燦爛藍shēng huà shì jì容量：2～8°C25克  轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 ，英文名： TFR/CD71 ELISA Kit

4-錄酰本安 98+% 4'-CHLOROcCqTcNILIDq 239-03-7  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

百里酚酞絡合指示劑shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  ELISAKitGelsolin小鼠凝溶膠蛋白規(guī)格：48T/96T

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。