公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠纖維細(xì)胞直銷
簡稱：MCA-205

種屬：小鼠

來源：纖維

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0867
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠纖維細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心劑; ; 強(qiáng)心苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

ucralose  56038-13-2  中文名：三氯蔗糖  分子式：C12H19Cl3O8  度：99.0%  關(guān)鍵詞：  人工甜味劑; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Tryptophan  153-94-6  中文名：  分子式：C11H12N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Troxerutin  7085-55-4  中文名：曲克蘆丁  分子式：C33H42O19  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Tropisetron   105826-92-4  中文名：鹽酸托烷司瓊  分子式：C17H21ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠纖維連接蛋白   英文名稱：   Fibronectin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FN  Memantine   中文名：鹽酸美金剛胺  分子式：C12H22ClN  度：98.0%

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱：    fibronecti   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FN  Memantine   41100-52-1  中文名：鹽酸美金剛胺  分子式：C12H22ClN 

小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid  147027-10-9  中文名：  分子式：C18H27N3O4S 

小鼠纖維蛋白肽B（FPB）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mequindox  13297-17-1  中文名：乙酰甲喹  分子式：C11H10N2O3  度：98.0%   

小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Mequindox  13297-17-1  中文名：乙酰甲喹  分子式：C11H10N2O3
Androstanolone 17-benzoate  1057-07-4  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3    人組織型纖溶酶原激活因子(tPA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit

Rosuvastain Calcium  147098-20-2  中文名：瑞舒伐他汀鈣  分子式：C22H28FN3O6S    人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit

Ambrisentan  177036-94-1  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4    人纖維蛋白(FBL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit

Propacetamol   66532-86-3  中文名：鹽酸丙帕他莫  分子式：C14H21ClN2O3    人生長激素受體(GHR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit               

Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO    人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠纖維細(xì)胞直銷鹿紅細(xì)胞膜蛋白elisa試劑盒   鹿紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   鹿紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：鹿紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒、鹿紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Buergerinin G  中文名：  分子式：C9H12O4  度：%

鱸魚溶菌酶/胞壁質(zhì)酶   英文名稱：   Lysozyme /Muramidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Lysozyme  Artesunate  中文名：青蒿琥酯  分子式：C19H28O8 

鱸魚皮質(zhì)醇   英文名稱：   Coisol   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CO  Artesunate  中文名：青蒿琥酯  分子式：C19H28O8  度：98.0%

硫氧還蛋白氧化還原酶（xR）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣  Venlafaxine   99300-78-4  中文名：鹽酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣              Rengyol  93675-85-5  中文名：連翹環(huán)己醇  分子式：C8H16O3
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。