基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠皮膚細胞特價
簡稱：B16-F10

種屬：小鼠

來源：；雄性；C57BL/6

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0238

使用方法：
收到細胞小鼠皮膚細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Sulfamonomethoxine   38006-08-5  中文名：磺胺間甲氧嘧啶鈉  分子式：C11H11N4NaO3S  度：98.0%      小鼠溶菌酶(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Sulfamonomethoxine  1220-83-3  中文名：磺胺間甲氧嘧啶  分子式：C11H12N4O3S  度：98.0%      小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sulfamethoxazole  723-46-6  中文名：磺胺甲噁唑  分子式：C10H11N3O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S  度：99.0%      小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sulfaguanidine  57-67-0  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S  度：99.0%      小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠脫氫表雄elisa試劑盒   小鼠脫氫表雄試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠脫氫表雄試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脫氫表雄試劑盒、小鼠脫氫表雄eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  L-Ascorbic acid  50-81-7  中文名：L-抗壞血酸  分子式：C6H8O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠脫氫表雄(DHEA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Griseofulvin  126-07-8  中文名：灰黃霉素  分子式：C17H17ClO6 

小鼠脫酶(ID)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lomefloxacin   中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3  度：98.0%

小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lomefloxacin   中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3 

小鼠褪黑素(MT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Lithocholic acid  中文名：石膽酸  分子式：C24H40O3  度：98.5%
Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  114772-34-8  中文名：  分子式：C15H14O2    人轉(zhuǎn)錄因子   英文名稱：   Human Engrailed-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EN-2

4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  152628-03-0  中文名：  分子式：C12H14N2O2    E選擇素   英文名稱：   Human E selectin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ES

Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2    上皮鈣粘蛋白   英文名稱：   Human E.cadherin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   E.cn

Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3    內(nèi)皮素受體A   英文名稱：   Human Endothelin Receptor A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EA

Norandrostenedione  734-32-7  中文名：19-去甲-4-雄烯二酮  分子式：C18H24O2    人轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit
小鼠皮膚細胞特價環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cAMP  Withaphysalin E  118985-24-3  中文名：  分子式：C28H34O7 

環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP  vibo-Quercitol  488-76-6  中文名：  分子式：C6H12O5 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AIL R1  Perforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體 3(AIL R3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     Arbidol   中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體 1(AIL R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Arbidol   中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S  度：98.0%