公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 鼠腸粘膜微內(nèi)皮細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng)：RIMEC

種屬：大鼠

來(lái)源：腸粘膜；微；內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0568
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞鼠腸粘膜微內(nèi)皮細(xì)胞直銷(xiāo)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Pefloxacin mesylate  70458-95-6  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S  度：98.0%      小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠緊張素 I (mouse ANG I)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) Phoenix

Pazopanib  444731-52-6  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S  度：98.0%      小鼠緊張素 II (mouse ANG II)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) Phoenix

Paroxetine   78246-49-8  中文名：鹽酸帕羅西汀  分子式：C19H21ClFNO3  度：99.0%      mouse CD 40L ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名：重樓皂苷VII  分子式：C51H82O21  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    大鼠 C 反應(yīng)蛋白 (rat CRP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) ADI
小鼠上腺素(E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Hydroxyprogesterone  68-96-2  中文名：羥孕酮  分子式：C21H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠上腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse    規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   EPI  Dabigatran etexilate  中文名：  分子式：C34H41N7O5 

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽elisa試劑盒   小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒、小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Iloperidone  133454-47-4  中文名：伊潘立酮  分子式：C24H27FN2O4 

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Diclofenac   15307-79-6  中文名：雙氯芬酸鈉  分子式：C14H10Cl2NNaO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Ikshusterol 3-O-glucoside  112137-81-2  中文名：  分子式：C35H60O7
2-Benzylacrylic acid  5669-19-2  中文名：  分子式：C10H10O2    組織HCK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Racecadotril  81110-73-8  中文名：消旋卡多曲  分子式：C21H23NO4S    HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副病毒IgG抗體(ai-PIVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  147086-79-1  中文名：  分子式：C8H8OS2    豚鼠白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit

Dorzolomide   130693-82-2  中文名：鹽酸多佐胺  分子式：C10H17ClN2O4S3    Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒

Quetiapine fumarate  111974-72-2  中文名：富馬酸喹硫平  分子式：C46H54N6O8S2    RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
鼠腸粘膜微內(nèi)皮細(xì)胞直銷(xiāo)大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Triptoquinone A  142950-86-5  中文名：  分子式：C20H24O4  度：%  關(guān)鍵詞： 

催乳素   英文名稱(chēng)：   Prolactin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PRL  O-Benzyl-L-serine  4726-96-9  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3 

催產(chǎn)素   英文名稱(chēng)：   Oxytocin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   OT  Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside  1186628-87-4  中文名：  分子式：C41H58O14  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  ; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

促上腺皮質(zhì)激素   英文名稱(chēng)：   Adrenocor Ticoopic Hormore   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ACTH  Olanzapine  132539-06-1  中文名：奧氮平  分子式：C17H20N4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

促紅細(xì)胞生成素受體 ( EPO Receipter)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名：  分子式：C28H44O3  度：97.0%
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。