使用方法：
收到細(xì)胞正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng)：NHEK

種屬：人

來(lái)源：表皮；角質(zhì)形成層

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0659

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Lomefloxacin   98079-52-8  中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3  度：98.0%      小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體elisa試劑盒   小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體試劑盒、小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Lithocholic acid  434-13-9  中文名：石膽酸  分子式：C24H40O3  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  膽烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶elisa試劑盒   小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Linderaspirone A  1235126-46-1  中文名：  分子式：C34H32O10  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白elisa試劑盒   小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Lincomycin   859-18-7  中文名：鹽酸林可霉素  分子式：C18H35ClN2O6S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)elisa試劑盒   小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒、小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Lincomycin  154-21-2  中文名：林可霉素  分子式：C18H34N2O6S  度：98.0%      小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶elisa試劑盒   小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒、小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠腦脊髓炎病毒（TMEV）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ficaprenol 11  中文名：  分子式：C55H90O 

小鼠腦紅蛋白elisa試劑盒   小鼠腦紅蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠腦紅蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠腦紅蛋白試劑盒、小鼠腦紅蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Fingolimod   中文名：鹽酸芬戈莫德  分子式：C19H34ClNO2 

小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S 

小鼠腦啡肽（ENK）ELISA試劑盒   96T   試劑盒   組裝/原裝           Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O
Benzenesulfonic acid  1998/11/3  中文名：苯磺酸  分子式：C6H6O3S    Rabbitmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Amlodipine  88150-42-9  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5    CLIAKitforBetaManase(HumanAlphamannosidase)ELISAKit人β甘露糖苷酶規(guī)格：48T/96T

Propranolol   318-98-9  中文名：鹽酸普萘洛爾  分子式：C16H22ClNO2    細(xì)菌茁糖酵解溴百里酚藍(lán)(BTB)瓊脂平板50個(gè)

Propafenone   34183-22-7  中文名：鹽酸普羅帕酮  分子式：C21H28ClNO3    RabbitDihydrotestosterone,DHTELISAKit兔雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Procaine   1951/5/8  中文名：鹽酸普魯卡因  分子式：C13H21ClN2O2    豚鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)ELISA試劑盒 ，英文名： 25 HVD3 ELISA Kit
正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞特價(jià)Vildagliptin  中文名：維達(dá)列汀  分子式：C17H25N3O2    魚(yú)雌激素elisa試劑盒   魚(yú)雌激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   魚(yú)雌激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚(yú)雌激素試劑盒、魚(yú)雌激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Vilazodone   中文名：鹽酸維拉唑酮  分子式：C26H28ClN5O2    魚(yú)雌二醇elisa試劑盒   魚(yú)雌二醇試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   魚(yú)雌二醇試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚(yú)雌二醇試劑盒、魚(yú)雌二醇eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

vibo-Quercitol  中文名：  分子式：C6H12O5    氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒   氧化型谷胱甘肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   氧化型谷胱甘肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：氧化型谷胱甘肽試劑盒、氧化型谷胱甘肽Eeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Venlafaxine   中文名：鹽酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2    魚(yú)促卵泡素   ELISA.   96T/48T

Venlafaxine  中文名：文拉法辛  分子式：C17H27NO2    魚(yú)促黃體激素   ELISA.   96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。