使用方法：
收到細胞人脈絡膜細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人脈絡膜細胞直銷
簡稱：OCM-1A

種屬：人

來源：脈絡膜；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE01293

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Atorvastatin calcium  134523-03-8  中文名：阿托伐他汀鈣  分子式：C33H35FN2O5  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4  度：99.0%      小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Aspergillon A  2239299-08-0  中文名：  分子式：C22H32O  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Aspartame  22839-47-0  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Artesunate  88495-63-0  中文名：青蒿琥酯  分子式：C19H28O8  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒      試劑盒   組裝/原裝
小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dimethylolurea  140-95-4  中文名：雙羥甲脲  分子式：C3H8N2O3  度：98.0%   

小鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP  Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氫洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%

小鼠壞死因子樣弱凋亡因子（TWEAK）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝    中文名：利多卡因  分子式：C14H22N2O 

小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(mouse AIL R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     Neritaloside  465-13-4  中文名：  分子式：C32H48O10 

小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝    137-58-6  中文名：利多卡因  分子式：C14H22N2O  度：98.0%  關鍵詞：
Withaphysalin E  118985-24-3  中文名：  分子式：C28H34O7    HumanPeptideγ,PγELISAKit人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Withaphysalin S  949172-13-8  中文名：  分子式：C29H40O8    兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8    Human aial naiuretic peptide (ANF) ELISA Kit 人心納素(ANF)ELISA試劑盒

價格：￥4,300 / 5 mg  中文名：  別名：  性狀：Powder  關鍵詞：      Humanai-Mi2-aibodyELISAKit 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Convallatoxin  508-75-8  中文名：鈴蘭毒苷  分子式：C29H42O10    HumanElastin,ELNELISA試劑盒人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人脈絡膜細胞直銷Stigmasta-4,22,25-trien-3-one  中文名：  分子式：C29H44O    Aipain,Di   1g              

Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C29H50O3    植物25羥基維生素D3elisa試劑盒   植物25羥基維生素D3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   植物25羥基維生素D3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：植物25羥基維生素D3試劑盒、植物25羥基維生素D3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Stigmast-4-ene-3β,6β-diol  中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇  分子式：C29H50O2    魚孕激素elisa試劑盒   魚孕激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚孕激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：魚孕激素試劑盒、魚孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Stigmast-4-ene-3,6-dione  中文名：豆甾-4-烯-3,6-二酮  分子式：C29H46O2    魚類狀腺原酸elisa試劑盒   魚類狀腺原酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚類狀腺原酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：魚類狀腺原酸試劑盒、魚類狀腺原酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Stellasterol  中文名：星魚甾醇  分子式：C28H46O    魚類皮質(zhì)醇elisa試劑盒   魚類皮質(zhì)醇試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚類皮質(zhì)醇試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：魚類皮質(zhì)醇試劑盒、魚類皮質(zhì)醇eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。