公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人卵巢內(nèi)膜癌細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：SNU-251

種屬：人

來(lái)源：卵巢內(nèi)膜癌；腹水轉(zhuǎn)移；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01101
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人卵巢內(nèi)膜癌細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Androstenediol-3-acetate  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3    髓過(guò)氧化物酶（MPO）檢測(cè)   Myeloperoxidase (MPO) detection

Androstenediol  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2    酶（CAT）檢測(cè)   Catalase (CAT) detection              

Androstanolone heptanoate  中文名：雄諾龍庚酸酯  分子式：C26H42O3    總抗氧化能力（T-AOC）檢測(cè)試劑盒（比色法）

Androstanolone acetate  中文名：雄諾龍醋酸酯  分子式：C21H32O3    谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）測(cè)定試劑盒（比色法）

Androstanolone 17-benzoate  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3    二（MDA）測(cè)定試劑盒（TBA法）
鹽酸胍   100g  Zileuton  111406-87-2  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

鹽快速測(cè)試盒   Niate rapid test case                 4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名：  分子式：C16H16N4O3 

亞鹽快速測(cè)試盒   Niite rapid test case  Physapruin A  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%

亞鹽測(cè)定試劑盒（比色法）  Physaminimin C  中文名：  分子式：C28H38O8  度：98.0%

亞鹽測(cè)定試劑盒   Sulfite determination kit                 Rebeprazole   117976-90-6  中文名：雷貝拉唑鈉  分子式：C18H20N3NaO3S
rsodeoxycholic acid  中文名：熊去氧膽酸  分子式：C24H40O4  度：98.0%  兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Deoxycholic acid  中文名：去氧膽酸  分子式：C24H40O4  度：98.5%  兔細(xì)胞間粘附分子-1 (rabbit ICAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Timosaponin AIII  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13  度：98.5%  兔干擾素-a(rabbit IFN-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Diosgenin  中文名：薯蕷皂苷元  分子式：C27H42O3  度：98.0%  兔干擾素-β(rabbit IFN-β)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sarsasapogenin  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3  度：99.0%  兔干擾素-r(rabbit IFN-r)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
人卵巢內(nèi)膜癌細(xì)胞直銷髓過(guò)氧化物酶（MPO）測(cè)定試劑盒  Ranolazine  中文名：雷諾嗪  分子式：C24H33N3O4 

酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣  Withanolide S  63139-16-2  中文名：醉茄內(nèi)酯S  分子式：C28H40O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內(nèi)酯; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

酸性酯酶染液   Eosinstain  4,4'-Diaminodiphenylsulfone  80-08-0  中文名：4,4'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S  度：98.0%   

酸性品紅（復(fù)紅）   5g  4,4'-Cyclohexylidenebisphenol  843-55-0  中文名：4,4'-環(huán)亞己基雙*  分子式：C18H20O2  度：98.0%   

酸性木聚糖酶測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣  Testosterone enanthate  中文名：庚酸睪酮  分子式：C26H40O3
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。