基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人口底癌細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：HSC-2

種屬：人

來(lái)源：口腔鱗癌；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0733

使用方法：
收到細(xì)胞人口底癌細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3    Fluorescamine   500mg

Allyl cinnamate  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2    熒光素   10g

Allopurinol  中文名：別嘌醇  分子式：C5H4N4O    Fluorescein   50g              

Allitol  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6    吲哚-3-   1g

Albendazole  中文名：阿苯達(dá)唑  分子式：C12H15N3O2S    Indole-3-ByicAcid(IBA)   5g
鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Periplocoside N  中文名：  分子式：C27H44O6  度：98.0%

鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Periplocoside N  中文名：  分子式：C27H44O6 

鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Periplocoside M  中文名：北五加皮苷M  分子式：C34H52O9  度：98.0%

鴨α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Periplocoside N  39946-41-3  中文名：  分子式：C27H44O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

血液結(jié)合素   英文名稱：   Hemopexin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HPX  Norethindrone  68-22-4  中文名：炔諾酮  分子式：C20H26O2
Marsdenoside F  中文名：  分子式：C39H60O14  度：%  兔固（ALD）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3  度：%  兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Schleicheol 1  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  兔去甲上腺素elisa試劑盒   兔去甲上腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔去甲上腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Uzarigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H46O8  度：97.5%  兔素F2aelisa試劑盒   兔素F2a試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔素F2a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔素F2a試劑盒、兔素F2a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Daturametelin I  中文名：  分子式：C34H48O10  度：93.0%  兔素E2elisa試劑盒   兔素E2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔素E2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔素E2試劑盒、兔素E2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
人口底癌細(xì)胞直銷桿菌(YP)核酸檢測(cè)試劑盒   48T  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0  中文名：  分子式：C28H46O2 

噬中性及細(xì)胞活化肽 -2(NAP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Testosterone isocaproate  中文名：異己酸睪酮  分子式：C25H38O3 

噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 -2(Eotaxin-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  3090-70-8  中文名：3-乙酰基-5α-雄烷二醇  分子式：C21H34O3  度：98.0%   

嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白   英文名稱：   eosinophil cationic protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ECP  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名：  分子式：C28H44O3  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  靈芝; 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 (Eotaxin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) Biosource  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4  中文名：  分子式：C28H44O4  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  靈芝; 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)