公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱(chēng)：HOS

種屬：人

來(lái)源：；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01474
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S    胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4   英文名稱(chēng)：   insulin-like growth factors binding protein-4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IGFBP-4

5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2    胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 -4(IGFBP-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C7H4ClNO4    球蛋白 IgA(IgA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

5-Benzyloxyindole  中文名：5-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO    球蛋白 IgE(IgE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

5-Benzyl-1H-tetrazole  中文名：5-芐基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O    球蛋白 IgG(IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
血0濃度測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣  p-Anisil  中文名：茴香偶酰  分子式：C16H14O4 

溴紫   5g  Olopatadine   中文名：鹽酸奧洛他定  分子式：C21H24ClNO3  度：98.0%

溴化乙錠   1g  Oleandrin  中文名：  分子式：C32H48O9  度：98.0%

溴酚蘭   10g  Olopatadine   140462-76-6  中文名：鹽酸奧洛他定  分子式：C21H24ClNO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

雄激素結(jié)合蛋白   英文名稱(chēng)：   Androgen Binding Protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ABP  Olanzapine  中文名：奧氮平  分子式：C17H20N4S  度：98.0%
2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4    兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one  1521197-43-2  中文名：  分子式：C16H15ClN4O    兔骨保護(hù)素(OPG)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

5'-Deoxy-5-fluorocytidine  66335-38-4  中文名：  分子式：C9H12FN3O4    兔胰淀素(Amylin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Doxifluridine  3094/9/5  中文名：  分子式：C9H11FN2O5    兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Tofacitinib   540737-29-9  中文名：枸櫞酸托法替尼  分子式：C22H28N6O8    兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)乳酸脫氫酶elisa試劑盒   乳酸脫氫酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   乳酸脫氫酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：乳酸脫氫酶試劑盒、乳酸脫氫酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one  4149/6/8  中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮  分子式：C9H9N3O  度：98.0%   

乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（微板法）  3-Allylrhodanine  1457-47-2  中文名：3-烯丙基羅丹寧  分子式：C6H7NOS2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（微板法）                    Ranolazine  95635-55-5  中文名：雷諾嗪  分子式：C24H33N3O4 

乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（比色法）  Ranolazine  95635-55-5  中文名：雷諾嗪  分子式：C24H33N3O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

乳酸脫氫酶（LDH）檢測(cè)   ATP enzyme ( and potassium, calcium and  ATP enzyme) detection  3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS  度：98.0%
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。