實(shí)驗(yàn)注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Felodipine 中文名：非洛地平 分子式：C18H19Cl2NO4 度：98.0%

小鼠球蛋白 E (mouse IgE) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 ADI     Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate  139481-41-7 中文名： 分子式：C26H23N3O3

小鼠泌乳素(PL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Felodipine 中文名：非洛地平 分子式：C18H19Cl2NO4

小鼠酶elisa試劑盒 小鼠酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酶試劑盒、小鼠酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Neoprzewaquinone A  630057-39-5 中文名： 分子式：C36H28O6

小鼠酶2(CA-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Eplerenone  107724-20-9 中文名：依普利酮 分子式：C24H30O6 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙醇脫氫酶質(zhì)量規(guī)格：>300U/mg,BRADA, Alcohol dehydrogenase

Promocell C-28030 Mononuclear Cell Medium, 單核細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 500ml吐溫80(化學(xué))質(zhì)量規(guī)格：CPTween-80

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)乙酸二丙基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)

PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸二戊基銨(約0.5mol/L水溶液)[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-DAAA (ca. 0.5mol/L in Water)

成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)乙酸二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-DHAA (ca. 0.5mol/L in Water)
SK-MEL-1, 皮膚色素瘤細(xì)胞 Human輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane質(zhì)量規(guī)格：含量≥99%（GC）

BCHE Others Human  BCHE / CHE1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷替曲塞Raltitrexed質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小氣道上皮細(xì)胞RNAHSAEpiC miRNA5 μgL-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽L-Ornithine L-aspartate salt質(zhì)量規(guī)格：>98%

SEMA5A Others Human  SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達(dá)莫Dipyridamole質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP

PC-3 細(xì)胞他米巴羅汀Tamibarotene質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%
Lamivudine  134678-17-4  中文名：拉米夫定 分子式：3O3S 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Lafutidine  118288-08-7  中文名：拉呋替丁 分子式：C22H29N3O4S 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體elisa試劑盒 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒、小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。

Labetalol   32780-64-6  中文名：鹽酸拉貝洛爾 分子式：C19H25ClN2O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白elisa試劑盒 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒、小鼠橫紋肌輔肌動蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。

L-(+)-Arginine  74-79-3  中文名：L-(+)-精氨酸 分子式：C6H14N4O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1elisa試劑盒 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。

Ketoprofen  22071-15-4  中文名：分子式：C16H14O3 度：99.0% 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體elisa試劑盒 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒、豚鼠主要組織相容性復(fù)合體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。

牛副結(jié)核分歧桿菌(MPB)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。