公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 大鼠心肌微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：CMECs

種屬：大鼠

來(lái)源：心肌微；內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0645
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞大鼠心肌微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone  2958-36-3  中文名：2-氨基-2',5-二氯二苯酮  分子式：C13H9Cl2NO  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Allylphenol  1745-81-9  中文名：2-烯丙基酚  分子式：C9H10O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-Acetylbutyrolactone  517-23-7  中文名：2-乙酰基丁內(nèi)酯  分子式：C6H8O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  3900-45-6  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠補(bǔ)體C*(mouse C*)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Benzo-15-crown 5-ether  中文名：苯并-15-冠5-醚  分子式：C14H20O5 

小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzo-15-crown 5-ether  中文名：苯并-15-冠5-醚  分子式：C14H20O5  度：98.0%

小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Chrysophanol 8-O-glucoside  13241-28-6  中文名：  分子式：C21H20O9  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  抗血小板; 抗凝; 大黃屬; 鼠李屬; 酸模屬; 蒽醌苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠病毒（MVM）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Losartan  114798-26-4  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠表皮調(diào)節(jié)素elisa試劑盒   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒、小鼠表皮調(diào)節(jié)素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Lamivudine  134678-17-4  中文名：拉米夫定  分子式：3O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sarmentocymarin  中文名：  分子式：C30H46O8 

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子   英文名稱：   Porcine Insulin-like Growth Factor-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IGF-1  S-Benzyl-L-cysteine  中文名：S-芐基-L-半胱氨酸  分子式：C10H13NO2S  度：98.0%

豬胰島素elisa試劑盒   豬胰島素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬胰島素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬胰島素試劑盒、豬胰島素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Sarsasapogenin  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3 

豬胰島素(INS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Sarafloxacin   91296-87-6  中文名：鹽酸沙拉沙星  分子式：C20H18ClF2N3O3 

豬胰島素(INS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sarmentocymarin  98633-61-5  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  ; 殺蟲; 毒毛旋花子; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
大鼠心肌微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2-Amino-3-methylbenzoic acid  中文名：2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式：C8H9NO2  度：98.0%

RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-6-chloropurine  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5 

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-6-chlorobenzothiazole  95-24-9  中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S 

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione  1971-49-9  中文名：2-乙酰基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮  分子式：C10H7NO3  度：93.0%  關(guān)鍵詞： 

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。