使用方法：
收到細胞大鼠成纖維細胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 大鼠成纖維細胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱：RAT2

種屬：大鼠

來源：成纖維細胞；自發(fā)永生；Fischer 344

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE01063

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

(+)-Noe's reagent  中文名：(+)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑  分子式：C24H38O3  度：98.0%  小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

1,2-Bis(3-indenyl)ethane  中文名：1,2-雙(3-茚基)乙烷  分子式：C20H18  度：98.0%  小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide  中文名：N-[雙(甲硫基)亞甲基]對甲苯磺酰胺  分子式：C10H13NO2S3  度：98.0%  小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪  分子式：C30H22N2O2  度：98.0%  小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide  中文名：N,N-雙(2-氯乙基)對甲苯磺酰胺  分子式：C11H15Cl2NO2S  度：98.0%  小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole  中文名：  分子式：C16H21N3O4S  度：98.0%

小鼠(mouse NO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Imidazo[1,2-b]pyridazine  中文名：  分子式：C6H5N3 

小鼠 IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 ADI  Azilsartan  147403-03-0  中文名：阿齊沙坦  分子式：C25H20N4O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  Azathioprine  中文名：硫唑嘌呤  分子式：C9H7N7O2S  度：98.0%

小鼠 ACTH(mouse ACTH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Phoenix  Otophylloside F  250217-73-3  中文名：青陽參苷F  分子式：C48H76O16  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  抗; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
植物維生素D3elisa試劑盒   植物維生素D3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   植物維生素D3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：植物維生素D3試劑盒、植物維生素D3 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Tryptophan  153-94-6  中文名：  分子式：C11H12N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

植物維生素D3(VD3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Tricetyl fingolimod  162358-09-0  中文名：  分子式：C25H39NO5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

植物維生素D3(VD3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Trillin  中文名：延齡草苷  分子式：C33H52O8 

植物維生素D2elisa試劑盒   植物維生素D2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   植物維生素D2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：植物維生素D2試劑盒、植物維生素D2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Testosterone benzoate  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3 

植物維生素D2(VD2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Tricetyl fingolimod  162358-09-0  中文名：  分子式：C25H39NO5
大鼠成纖維細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Odoroside H  中文名：  分子式：C30H46O8    小鼠多巴胺(DA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

O-Benzyl-L-tyrosine  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3    小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

O-Benzyl-L-serine  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3    小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

n-Tritriacontan-16,18-dione  中文名：  分子式：C33H64O2    中文名稱   方法   規(guī)格

Norfloxacin lactate  中文名：乳酸諾氟沙星  分子式：C19H24FN3O6    小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。