使用方法：
收到細(xì)胞大鼠成骨細(xì)胞直銷(xiāo)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀(guān)察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 大鼠成骨細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng)：ROS17/2.8

種屬：大鼠

來(lái)源：；ACI 9935

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0754

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

(-)-Phaselic acid  中文名：  分子式：C13H12O8    小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2   英文名稱(chēng)：   Tissue inhibitors of metalloproteinases 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TIMP-2

(-)-Noe's Reagent  中文名：(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑  分子式：C24H38O3    小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(-)-Mandelic acid benzyl ester  中文名：D-(-)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3    小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide  中文名：  分子式：C37H30BrFNP    小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

β-Sitosterol  83-46-5  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠雄烯二(ASD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methoxydienone  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2  度：98.0%

小鼠雄烯二(ASD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Neridienone B  61671-56-5  中文名：  分子式：C21H28O4  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠雄激素結(jié)合蛋白   英文名稱(chēng)：   Androgen Binding Protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ABP  Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  中文名：  分子式：Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 

小鼠雄激素(androgen)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methoxydienone  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2 

小鼠雄激素   英文名稱(chēng)：   Mouse Androgen   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ADG  Decoquinate  18507-89-6  中文名：癸氧喹酯  分子式：C24H35NO5  度：98.0%
2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione  1971-49-9  中文名：2-乙酰基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮  分子式：C10H7NO3    乳鐵蛋白（ Lactoferrin ）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

DL-Alanyl-DL-Mine  1999-43-5  中文名：DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸  分子式：C8H16N2O3S    抑制因子 (LIF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

2-Acetamidothiazole  2719-23-5  中文名：2-乙酰氨基噻唑  分子式：C5H6N2OS    脂蛋脂酶 A2(LP-PLA2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  2549-87-3  中文名：4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式：C16H14O3    脂肪細(xì)胞刺激因子 (LSP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  3900-45-6  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2    乳糖   100g
大鼠成骨細(xì)胞直銷(xiāo)內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氫龍  分子式：C19H30O3 

內(nèi)皮素受體A   英文名稱(chēng)：   Human Endothelin Receptor A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   EA  2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名：  分子式：C46H72O17 

內(nèi)皮素 -1(Endothelin-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxandrolone  中文名：氧甲氫龍  分子式：C19H30O3 

腺來(lái)源的內(nèi)皮生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng)：   endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   EG-VEGF  β-Sitosterol  83-46-5  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

內(nèi)啡肽 - b (Endorphin- b )   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氫龍  分子式：C19H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。