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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    • 貨號(hào):BK-P64578
    • 價(jià)格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-10-12
    • 更新日期: 2025-09-11
    產(chǎn)品詳請(qǐng)
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號(hào) BK-P64578
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號(hào)
    是否進(jìn)口

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號(hào)

    立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒

    50

    BK-P64578

    實(shí)驗(yàn)方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
    2.
    標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

    豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sertaconazole  中文名:舍他康唑  分子式:C20H15Cl3N2OS 

    豬細(xì)胞色素氧化酶(CC0ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Shikimic acid  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5  度:98.0%

    豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Shikimic acid  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5 

    豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Shikimic acid  138-59-0  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  莽草; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

    豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tenuifoliside A  139726-35-5  中文名:遠(yuǎn)志蔗糖酯分子式:C31H38O17
    CL-0405NCI-H716(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2雷特格韋質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRRaltegravir

    羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株,293001A細(xì)胞 NCI-H596 [H596](細(xì)胞)雷帕霉素/西羅莫司質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Rapamycin(Sirolimus)

    肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520氯硝柳胺質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRNiclosamide

    HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯硝柳胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Niclosamide

    EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0911環(huán)丙沙星質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Ciprofloxacin
    腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)Forskolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

    B16F10細(xì)胞,小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞;hFOB 1.19黃藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)Palmatine質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

    CCL17 Protein Human 重組 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白鹽酸西那卡塞;鹽酸甲狀旁腺激素Cinacalcet HCl,AMG073質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

    SHG-44 (細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 黃藤素Palmatine質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR

    ;MRC-5鏈霉蛋白酶/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶Pronase E質(zhì)量規(guī)格:BR4000u/mg,進(jìn)分
    Periplocoside N  中文名:  分子式:C27H44O6    雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Periplocoside M  中文名:北五加皮苷分子式:C34H52O9    雞球蛋白E(IgE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Periplocoside F  中文名:  分子式:C63H104O23    雞球蛋白A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

    Periplocogenin  中文名:  分子式:C28H42O6    中文名稱   方法   規(guī)格

    Periplocin  中文名:杠柳毒苷  分子式:C36H56O13    人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
    1
    RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
    立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    聯(lián)系方式
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