產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng)：PBMC 細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人外周血單個(gè)核細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：外周血單個(gè)核細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

單位:

貨號(hào)：E0480

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠(chǎng)等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀(guān)察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品：

Panaxydiol  中文名：  分子式：C17H24O2    人葡萄糖依賴(lài)性釋放多肽(GIP)ELISAKit  

Palmitone  中文名：棕櫚酮  分子式：C31H62O    人原(PI)ELISAKit  

Oxytetracycline hydrochloride  中文名：鹽酸土霉素  分子式：C22H25ClN2O9    人受體β(ISR-β)ELISAKit              

Oxymetholone  中文名：康復(fù)龍  分子式：C21H32O3    中文名稱(chēng)   方法   規(guī)格

Oxiracetam  中文名：奧拉西坦  分子式：C6H10N2O3    人瘦素受體(LEPR)ELISAKit
鳶尾苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tectoridin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠精酸/絲酸豐富剪接因子4(SRSF4)ELISA試劑盒 ，英文名： SRSF4 ELISA Kit

鳶尾黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tectorigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠精酸加壓素受體1B(AVPR1B)ELISA試劑盒 ，英文名： AVPR1B ELISA Kit

原B2(標(biāo)準(zhǔn)品)  Procyanidin B2  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠精酸加壓素原(VP)ELISA試劑盒 ，英文名： VP ELISA Kit

原人參二醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Protopanaxdiol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠精酸酶(Arg)ELISA試劑盒 ，英文名： Arg ELISA Kit

原人參三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Protopanaxatriol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA試劑盒 ，英文名： QSOX1 ELISA Kit

原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Protodioscin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

原蘇木素B/原巴西蘇木素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Protosappanin B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

遠(yuǎn)志酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Polygalacic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit 96T/48T

遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)  Senegenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒 ，英文名： MCSF ELISA Kit

月桂烯（香葉烯）  Myrcene  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥80%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 ，英文名： M-CSF ELISA Kit
Stigmastane-3β,5α,6β-triol  中文名：豆甾-3β,5α,6β-三醇  分子式：C29H52O3  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）ELISA試劑盒  

7α-Hydroxysitosterol  中文名：7α-羥基谷甾醇  分子式：C29H50O2  度：95.0%  兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒  

Ecdysterone 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C30H48O7  度：98.0%  兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒  

Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C28H46O3  度：97.5%  兔核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒           

Qingyangshengenin  中文名：青陽(yáng)參苷元  分子式：C28H36O8  度：97.5%  兔肌紅蛋白(rabbit Myoglobin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
PBMC 細(xì)胞Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside  1186628-87-4  中文名：  分子式：C41H58O14    HumanechinococcusaibodyIgGELISA試劑盒人包蟲(chóng)抗體IgGELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Periplocoside O  116709-67-2  中文名：北五加皮苷O  分子式：C36H56O10    組織PCTA1RE1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Otophylloside T  1642306-14-6  中文名：  分子式：C48H70O18    Humanpeptidylprolylisomerase(cyclophilin)-like1,PPIL1ELISAKit人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Periplocoside M  116782-73-1  中文名：北五加皮苷M  分子式：C34H52O9    兔子可溶性調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Polypodine B 20,22-acetonide  159858-85-2  中文名：20,22-異丙叉基水龍骨甾酮B  分子式：C30H48O8    Human cardiac specific oponin T (c) ELISA Kit 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒
注意事項(xiàng)：
PBMC 細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。