產(chǎn)品簡稱：KMB17細(xì)胞
中文名稱：人胚肺細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：胚肺；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01314

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

羥脯酸（Hyp）測定試劑盒（堿水解法）（測動物血清、組織、尿液）                    Rhein  478-43-3  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6 

強(qiáng)啡肽   英文名稱：   Human Dynorphin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DYN  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  中文名：  分子式：C28H46O2 

酸性0酶（PACP）檢測   Glamine syhetase (GS) detection                 Polypodine B  18069-14-2  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8 

素 E1(PGE1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Peri acid  82-75-7  中文名：周位酸  分子式：C10H9NO3S 

漆酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣              4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O5
5-氟吲哚-2-羧酸  5-Fluoroindole-2-carboxylic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,原裝進(jìn)口 ELISAKitelongin人延伸蛋白規(guī)格：48T/96T

3-環(huán)戊基-L-丙氨酸  3-Cyclopentane-L-alanine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP15 ELISA Kit

SEA-0400  SEA0400  質(zhì)量規(guī)格：>98%,鈉離子-鈣離子交換子（NCX）抑制劑 人胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒Humanypsinogen-2,y-ⅡELISAKit 96T/48T

卡格列凈半水；坎格列凈半水  Canagliflozin hemihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SGLT2) 抑制劑 大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)試劑盒 Rat Cyclin-D3 ELISA Kit

dT亞磷酰胺單體  dT Phosphoramidite  質(zhì)量規(guī)格：>98% 英文名稱RatVasoactiveIestinalPeptideELISAKit大鼠活性腸肽(VIP)規(guī)格：96T/48T

Bz-2'-脫氧胞苷亞磷酰胺單體  Bz-dC Phosphoramidite  質(zhì)量規(guī)格：>98% 果菜檸檬酸比色法定量檢測試劑盒20

匹多莫德  Pidotimod  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR ELISAKitNADPH人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸規(guī)格：48T/96T

匹多莫德（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pidotimod  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP14 ELISA Kit

硫酸羥基氯喹  Hydroxychloroquine Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人呋酮(AD)ELISA檢測試劑盒Humanamiodarone,ADELISAKit 96T/48T

乙酰唑胺  Acetazolamide  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒 Rat Cyclin-D2 ELISA Kit
VCL Others Mouse 小鼠 VCL / Vinculin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 纈沙坦（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Valsartan

CL-0109HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2格列吡嗪 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGlipizide

KMB-17細(xì)胞，人二倍體細(xì)胞系 轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞,T2細(xì)胞 KM小鼠子瘤株;U27頭孢噻呋鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Ceftiofur

B16(小鼠色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2頭孢噻呋鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Ceftiofur

CTSS Others Human 人 CTSS / Cathepsin-S 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5'-三1酸胞苷二鈉鹽(二水)質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級Cytidine-5'-triphosphate(CTP) di salt dihydrate
KMB17細(xì)胞EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二苯并[a,h]蒽(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)Dibenz[a,h]anthracene

A549, 人細(xì)胞系二苯并[b,def]芘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Dibenzo[b,def]chrysene

THP 1細(xì)胞，單核細(xì)胞型瘤細(xì)胞 人細(xì)胞高轉(zhuǎn)移亞系,PC-3M 2B4細(xì)胞 人結(jié)膜成纖維細(xì)胞總RNAHConF NA1,2:8,9-二苯并五苯質(zhì)量規(guī)格：1,2:8,9-Dibenzopentacene

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A二苯并[g,p]稠二萘(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)Dibenzo[g,p]chrysene

ESAM Others Human 人 ESAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)吡酮-d11質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Ciclopirox-d11
注意事項：
KMB17細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。