產(chǎn)品簡稱：NRK-52E細(xì)胞
中文名稱：大鼠腎細(xì)胞

規(guī)格：1×106

種屬：大鼠

來源：腎；自發(fā)永生；Osborn BKMendel

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:T25/瓶

貨號(hào)：E0060

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

胰蛋白酶抑制劑   10g  Polyphyllin D  50773-41-6  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

胰蛋白酶檢測(cè)   Alkaline phosphatase (AKP) detection  Polypodine B  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8  度：97.5%

胰蛋白酶測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/48樣  Tetracaine hydrochloride  136-47-0  中文名：鹽酸丁卡因  分子式：C15H25ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

胰蛋白酶測(cè)定試劑盒（紫外比色法）                    Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  153012-37-4  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2 

胰蛋白酶1:250   250g  Polyphyllin D  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16  度：98.0%
蟛蜞菊內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg 犬巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 Canine Macrophage-Derived Chemokine,MDC/CCL22 ELISA Kit

霹靂蘿芙木堿 HPLC≥98% 10mg 英文名稱HumapPELISAKit人前體蛋白(TpP)規(guī)格：96T/48T

平貝堿甲 HPLC≥98% 20mg 化線粒體蛋白質(zhì)濃度定量測(cè)定試劑盒20

蘋果酸 HPLC≥98% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒大鼠樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蒲公英賽醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA試劑盒 ，英文名： REG-1a ELISA Kit

蒲公英甾醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測(cè)試劑盒MousecoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T

蒲公英甾醇乙酸酯 HPLC≥98% 10mg 人精脒/精胺N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移酶樣蛋白1(SATL1)試劑盒 Human SATL1 ELISA Kit

普拉洛芬 HPLC≥98% 20mg RatAngiogenin,ANGELISAKit大鼠生長素(ANG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

七葉膽苷XVII HPLC≥98% 20mg 載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

七葉樹皂苷B HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Proglumide質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)質(zhì)量規(guī)格：>98%,高度選擇性的PPARβ/δ激動(dòng)劑

牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4)布洛芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Ibuprofen質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

A172細(xì)胞，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 ,HepG2細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205比沙可啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Bisacodyl質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠瘤株;S180醋酸氯己定（標(biāo)準(zhǔn)品）Chlorhexidine Acatate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
NRK-52E細(xì)胞小鼠卵巢顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL芝麻酚(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCSesamol

MLTC-1小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 MLTC-1 mouse Leydig cell tumor RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS粗孔柱層析硅膠(20-60目,FCP Grade)質(zhì)量規(guī)格：20-60目,層析用Silica gel for column chromatography

IL22 Protein Human 重組人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋白粗孔柱層析硅膠(100-200目,FCP Grade)質(zhì)量規(guī)格：100-200目,層析用Silica gel for column chromatography

SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PT-67(病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞)粗孔柱層析硅膠(300-400目,FCP Grade)質(zhì)量規(guī)格：300-400目,層析用Silica gel for column chromatography

CL-0020Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氧化前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Oxypeucedanin
注意事項(xiàng)：
NRK-52E細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。