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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    敗血波氏桿菌(博德特氏桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-P64553
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-09-29
    • 更新日期: 2025-12-11
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號 BK-P64553
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號
    是否進口

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號

    敗血波氏桿菌(博德特氏桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒

    50

    BK-P64553

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標記 6 個離心管,分別為 76,5,4,32。
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    豬可溶性內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Taxilluside A  1661914-46-0  中文名:  分子式:C18H24O10 

    豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Stigmastane-3β,5α,6β-triol  20835-91-0  中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇  分子式:C29H52O3  度:96.5%  關(guān)鍵詞:  甘蔗; 分株紫萁; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

    豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Sorafenib tosylate  475207-59-1  中文名:索拉非尼  分子式:C28H24ClF3N4O6S 

    豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Stigmastane-3β,5α,6β-triol  20835-91-0  中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇  分子式:C29H52O3 

    豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Stigmasterol  中文名:豆甾醇  分子式:C29H48O
    DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽)dAMP-Na2;脫氧腺苷1酸二鈉質(zhì)量規(guī)格:>98,BR2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2)

    ;HFL1 成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLATP.Na2; 腺苷-5-1酸二鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng),三水合物5'-ATP-Na2

    EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KMY0909美西林/氮脒青霉素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRMecillinam

    口腔角質(zhì)細胞(HOK)( 5×105 )甲羥孕酮/安宮黃體素質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMedroxyprogesterone

    CL-0407NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2甲羥孕酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品Medroxyprogesterone
    臍平滑肌細胞分子篩, 5 ?(40-60,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 5 ?質(zhì)量規(guī)格:40-60,氣相、液相色譜柱

    臍內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C 甲狀腺濾泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL分子篩, 5 ?(60-80,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 5 ?質(zhì)量規(guī)格:60-80,氣相、液相色譜柱

    ;IMR-90分子篩, 5 ?(80-100,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 5 ?質(zhì)量規(guī)格:80-100,氣相、液相色譜柱

    COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 分子篩, 5 ?(干燥劑用)Molecular sieves, 5 ?質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用

    CL-0323BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞)5×106cells/瓶×2分子篩, 5 ?(pellets,3-5 mm)Molecular sieves, 5 ?質(zhì)量規(guī)格:pellets,3-5 mm
    Minisecolide C  中文名:  分子式:C28H34O7    豬白介素17(IL-17)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Miconazole nitrate  中文名:硝酸咪康唑  分子式:C18H15Cl4N3O4    豬白介素12IL-12ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Metronidazole  中文名:甲硝唑  分子式:C6H9N3O3    豬白介素10(IL-10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Metoclopramide  中文名:甲氧氯普胺  分子式:C14H22ClN3O2    豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

    敗血波氏桿菌(博德特氏桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒Methyltestosterone  中文名:甲基  分子式:C20H30O2    豬白介素1β(IL-1β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    聯(lián)系方式
    手機:13564080845
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