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    上海帛科生物技術有限公司
       
       
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    禽正呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產地:進口、國產
    • 貨號:BK-P64636
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發布日期: 2020-07-07
    • 更新日期: 2025-09-11
    產品詳請
    產地 進口、國產
    品牌 帛科
    貨號 BK-P64636
    用途 公司產品僅用于科研
    包裝規格 50次
    純度 %
    CAS編號
    是否進口


    絲狀鏈霉菌   枝芽胞桿菌 Virgibacillus sp.
    脫硫弧菌脫硫亞種(脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌)   枝芽胞菌 Virgibacillus sp.
    擬熱帶假絲酵母   鹽水球菌 Salinococcus sp.
    許旺酵母變種   蘇云金芽胞桿菌勵木亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tochigiensis
    胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)90mm   盲腸腸球菌
    海棗曲霉   巴西毛殼
    噬糖鹽紅菌 
    本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產品名稱

    規格

    貨號

    禽正呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

    50

    BK-P64636

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer
    5 μl     dNTP mix
    2mM
    4 μl
    引物110pM
    2 μl
    引物210pM
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl
    1 μl
    ddH2O 50 μl

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標記 6 個離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    中國倉鼠卵巢細胞;CHO鹽酸雷尼替丁Ranitidine HCl質量規格:>98%

    Tul-1細胞,細胞系 大鼠肝上皮樣干細胞,WB-F344細胞 T-101B胰蛋白酶(100mL 酶解緩沖液)10mL鹽酸雷尼替丁(標準品)Ranitidine HCl質量規格:HPLC>98%,標準品

    SK-MES-1(肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2熒光素鈉Fluorescein di salt質量規格:BS

    HUVEC-c pre-screened 預選型正常臍內皮細胞(HUVEC) 500,000cells 大隱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽D-Luciferin  salt質量規格:>98%

    原代骨骼肌細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽2',7'-Dichlorofluorescein  Salt 質量規格:>98%
    骨骼肌細胞生長添加物SkMCGS奧美拉唑-d3Omeprazole-d3質量規格:美國進口

    VEGFA Others Human  VEGF121b / VEGF-A 細胞裂解液 (陽性對照) 奧美拉唑酸二鈉鹽Omeprazole Acid Di Salt質量規格:美國進口

    癌細胞;MDA-MB-435S2-代腺苷2-Iodo Adenosine質量規格:美國進口

    CNE-2Z細胞,母系細胞 小鼠*瘤細胞,SP2/0細胞 恒河猴腎細胞;RM-1N6-丙酰蟲草素N6-Propionyl Cordycepin 質量規格:美國進口

    MSTO-211H(細胞) 5×106cells/瓶×2N6-月桂酰蟲草素N6-Lauroyl Cordycepin 質量規格:美國進口
    上皮細胞培養基-2EpiCM-2-prf強力霉素鹽酸鹽Doxycycline 質量規格:美國進口

    CDH2 Others Human  N-Cadherin / CD325 / CDH2 細胞裂解液 (陽性對照) 強力霉素磺基水楊酸Doxycycline ssa質量規格:美國進口

    原胚腎轉化細胞;293 Ad5強力霉素海克酸鹽Doxycycline Hyclate質量規格:美國進口

    HNE3細胞,細胞 小鼠瘤細胞,EL4細胞 CM-H022成纖維細胞完全培養基100mL帕米1酸二鈉鹽Pamidronate, Di Salt質量規格:美國進口

    NCI-N87(細胞) 5×106cells/瓶×2頭孢呋辛Cefuroxime質量規格:美國進口
    ES-2 卵巢透明細胞癌細胞秦皮甲素(標準品)Esculin質量規格:≥98%,標準品

    CW-2腺癌細胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS氨基三乙酸(標準品)Nitrilotriacetic acid質量規格:供HPLC法雜質檢查用

    TNFSF13 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標簽)13-(標準品)1,3- Propylene Glycol質量規格:供檢查用

    脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 ) RajiButt's瘤細胞 Human二甘醇(標準品)Diethylene Glycol質量規格:供檢查用

    ;Calu-3氯噻嗪(標準品)Chlorothiazide質量規格:供HPLC法系統適用性試驗用

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    禽正呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR


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