公司產品僅用于科研實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
公司產品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

10. 尿道細胞系統S-乙酰基硫代化膽堿(>99%,醫藥級)質量規格：>99%,醫藥級S-Acetylthiocholine iodide

CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2N-丁二酸,S-乙?；叶减?span>(>98%,BR)質量規格：>98%,BRS-Acetylthioglycolic acid N-hydroxysuccinimide ester

人癌細胞;MDA-MB-468 大鼠小腦顆粒細胞完全培養基 100mL水楊醇(>98%,BR)質量規格：>98%,BRSalicyl alcohol

Pcc4 小鼠SB3-18質量規格：BRSB3-18

SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 魯斯考皂苷元(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Ruscogenin
KYSE150 食管鱗癌西米替?。藴势罚┵|量規格：HPLC>98%,標準品Cimetidine

ME-180頸表皮癌細胞 ME-180 human cervical epidermoid carcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS阿德福韋/阿德福韋酯質量規格：>99%,可用于細胞培養Adefovir dipivoxil

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白吲哚菁綠質量規格：>94%,BSIndocyanine Green

小鼠海馬趾星形膠質細胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 細胞株 Human靛藍質量規格：BSIndigotin

大鼠腎小管上皮細胞RRTEpiC甲基藍質量規格：ARMethyl blue
豚鼠胚胎細胞;104C1綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質量規格：100μg/ml,u=4%

AsPc-1細胞，轉移*癌細胞 正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質量規格：0.99

HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標準品,98.6%)Clofentezine質量規格：分析標準品,98.6%

Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標準品)Fenuron質量規格：分析標準品

心肌細胞-心室cDNAHCF-av cDNA丁(B9)(標準品)Daminozide質量規格：分析標準品
NCI-H446[H446]細胞，小細胞細胞 人癌細胞系,ZR-75-30細胞 615小鼠T細胞性瘤株;L7712鹽酸-Na-本甲酰-L-精酸乙酯，英文名或英文縮寫：BAEE，級別：BR，98%，規格：10克

小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)3-(三基硅基)溴炳決 3-BROMO-1-(TRIMqTHYLSILYL)-1-PROPYNq 3800-42-8

IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細胞裂解液 (陽性對照) ETHANOLANxy7noUS,DENATURED1試劑級透明液體RT不sigma

人骨骼肌成肌細胞裂解物HSkMMLN-芴甲氧羰基-D-天冬酰，英文名或英文縮寫：Fmoc-D-Asn-OH，級別：特，98%，規格：100克

細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸test111