PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯(lián)本四，英文名或英文縮寫：DAB，級別：BR，85%，規(guī)格：100克

SGC-7901細(xì)胞，胃腺癌細(xì)胞 人細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亞磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 失水蘋果1，英文名或英文縮寫：MA，級別：CP，規(guī)格：25克

人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 芍藥苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品Paeoniflorin

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNAHOPC cDNA芍藥苷(40%)質(zhì)量規(guī)格：≥40%Paeoniflorin

MCF-7細(xì)胞，人癌細(xì)胞 人肺鱗癌細(xì)胞,LTEP-s細(xì)胞 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)質(zhì)量規(guī)格：≥50%,BRPaeoniflorin

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild芍藥苷(90%)質(zhì)量規(guī)格：≥90%Paeoniflorin

PLAT Others Human 人 tPAβ 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
人羊膜細(xì)胞;WISHHEPPS(EPPS)HEPPS (EPPS)超級25G16052-06-5RT

犬胸腺細(xì)胞;cf2Th SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞，SRSV/3T3細(xì)胞 CCC-Ca761-03細(xì)胞，小鼠癌細(xì)胞2-安基庚烷;2-庚安;1-基己安 2-cMinohqptcnq;2-HqptylcMinq;1-MqthylhqxylcMinq;Hqptin;Hqptqdrinq;TucMinq;TucMinohqptcnq;2-HqptcncMinq; 13-8-0

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17GENEPAGE8%EZSQUEEZE*CLDPAK* 8% GENE PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術(shù)級10X75MLCOLD

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) -2-羧酸，英文名或英文縮寫：TCH，級別：AR，99.5%，規(guī)格：250克

Hepa 1-6, 小鼠細(xì)胞鹽酸N-(1-Naphthyl)etxylenediamine dixy7nochloride
兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Promocell C-23020 Fibroblast Growth Medium 2, 成纖維細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml分子篩4A( beads,8-12 mesh)Molecular sieves, 4 ?質(zhì)量規(guī)格：beads,8-12 mesh

黃胸鼠;YCR分子篩, 5 ?(20-40目,氣相、液相色譜柱專用)Molecular sieves, 5 ?質(zhì)量規(guī)格：20-40目,氣相、液相色譜柱專用

CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))4,7-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

人外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,7-二溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

Tca-8113細(xì)胞，人舌癌細(xì)胞 鼠傷寒沙門氏菌Ta102 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK2,2'-二溴-9,9,-螺二[9H-芴](>95.0%(GC))2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。